细叶百合LpWRKY20基因的克隆及其对烟草的遗传转化的任务书.docx

细叶百合LpWRKY20基因的克隆及其对烟草的遗传转化的任务书
任务书
项目名称：细叶百合LpWRKY20基因的克隆及其对烟草的遗传转化
项目概述：
细叶百合是一种具有药用价值的植物，其含有多种生物活性成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血压等多种药理作用。其中，WRKY转录因子家族在植物的免疫反应、发育调控、逆境适应等方面发挥着重要的作用。本研究将克隆细叶百合中LpWRKY20基因，并将其转化到烟草中，以探究该基因对烟草的生长发育和逆境适应的影响，为研究WRKY基因家族的功能提供新的思路。
研究内容：
1.从细叶百合中克隆LpWRKY20基因，并进行序列分析和构建启动子、植物表达载体等基础工作。
2.将构建好的LpWRKY20基因表达载体通过农杆菌介导法转化到烟草中，转化后的植株进行筛选和鉴定。
3.对转化的烟草进行生理生化指标分析，包括植株生长情况、抗氧化酶活性、胁迫诱导表达等，分析LpWRKY20基因对烟草的生长发育和逆境适应的影响。
4.探究LpWRKY20基因的作用机制，通过对转化植株中的基因表达水平、代谢产物分析等手段，分析其在烟草中的调控作用。
预期成果：
1.成功克隆LpWRKY20基因并进行序列分析，构建相关表达载体和植物结构域预测等基础工作；
2.成功将构建的表达载体转化到烟草中，筛选出稳定的转基因株系，对其生理生化指标进行分析；
3.通过对转化植株的基因表达水平和代谢产物分析等手段，探究LpWRKY20基因在烟草中的作用机制；
4.为探究WRKY基因家族的功能提供新的思路和方法。
研究意义：
LpWRKY20基因是细叶百合中WRKY转录因子家族的一员，其在植物的生长发育和逆境适应等方面可能发挥着重要的作用。本研究将LpWRKY20基因转化到烟草中，旨在通过对转基因植株的生理生化指标分析，探究其对烟草的影响和调控机制，为研究WRKY基因家族的功能提供新的思路和方法。
计划进度：
研究周期：2年
第1年：
1.月份：第1-2个月，完成LpWRKY20基因的克隆和序列分析等基础工作；
2.月份：第3-6个月，完成构建表达载体和载体筛选等工作，并开始进行烟草遗传转化实验；
3.月份：第7-12个月，对转化的植株进行鉴定和生理生化指标分析等工作。
第2年：
1.月份：第13-18个月，对转化植株中的基因表达水平和代谢产物分析等手段，深入探究LpWRKY20基因在烟草中的作用机制；
2.月份：第19-20个月，对研究成果进行整理和分析，撰写期刊论文和专著章节，并申请专利。
经费支持：
本研究由国家自然科学基金资助，经费总额为50万元，其中，实验费用占80%，设备购置占10%，人员薪酬、差旅和出版费等占10%。本研究还将联合国内几家知名农业科技公司开展产业化研究和推广。
参考文献：
1.RamsayNA,GloverBJ.MYB-bHLH-WD40proteincomplexandtheevolutionofcellulardiversity.TrendsPlantSci,2005,10:63-70.
2.EulgemT,SomssichIE.NetworksofWRKYtranscriptionfactorsindefensesignaling.CurrOpinPlantBiol,2007,10:366-371.
3.PandeySP,RoccaroM,SchönM,LogemannE,SomssichIE.TranscriptionalreprogrammingregulatedbyWRKY18andWRKY40facilitatespowderymildewinfectionofArabidopsis.PlantJ,2010,64:912-923.