调节性T细胞与Th17细胞在支气管哮喘中失衡表达的实验研究的任务书.docx

调节性T细胞与Th17细胞在支气管哮喘中失衡表达的实验研究的任务书
任务书
题目：调节性T细胞与Th17细胞在支气管哮喘中失衡表达的实验研究
一、研究背景
支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸系统疾病，其主要特征是气道炎症、气道高反应性和重复发作的喘息、气急、胸闷等症状。虽然支气管哮喘的发病机制尚不完全清楚，但已经证实，免疫系统的异常激活与失衡是其发生发展的重要因素。在免疫系统中，T细胞具有非常重要的调节作用，调节性T细胞（Treg）和Th17细胞作为免疫系统中两种重要的亚群，在支气管哮喘的发病中的作用倍受关注。
二、研究目的
本研究旨在探究调节性T细胞与Th17细胞在支气管哮喘中失衡表达的机制，为深入了解支气管哮喘的免疫学机制提供实验依据。
三、研究内容
1.实验设计
本实验将建立小鼠支气管哮喘模型和正常对照组，并对两组小鼠的Treg细胞和Th17细胞进行比较分析。
2.实验步骤
（1）建立小鼠支气管哮喘模型
选用6-8周龄的BALB/c小鼠进行实验，将其按照一定比例随机分为实验组和对照组，分别给予海洛因或生理盐水进行刺激，制备小鼠支气管哮喘模型。
（2）对T细胞抽取和检测
分别于建模后第7天采集小鼠外周血和支气管灌洗液，对其中的Treg细胞和Th17细胞进行分离、鉴定和检测。其中Treg使用CD4+CD25+浓缩磁珠纯化，Th17通过FACS流式细胞术进行鉴定计数。
（3）RNA检测
采用RT-qPCR实验方法，对Treg和Th17细胞中IL-17、TGF-β1、IL-10等细胞因子的基因表达进行检测。
3.数据分析
使用GraphPadPrism7软件进行数据处理，对两组实验数据进行比较分析，分析其差异性、相关性等统计学参数。
四、工作计划
1.第1-2周：阅读相关文献，了解研究背景和相关技术；
2.第3-4周：小鼠建模，收集外周血和支气管灌洗液样品；
3.第5-6周：T细胞分离、鉴定和检测，RNA提取、合成cDNA、PCR扩增等实验工作；
4.第7-8周：数据统计与分析；
5.第9周：结果汇总，撰写实验报告。
五、预期成果
1.建立小鼠支气管哮喘模型；
2.实验检测Treg与Th17细胞的数量、比例变化；
3.检测调节性T细胞和Th17细胞中IL-17、TGF-β1、IL-10等细胞因子的基因表达情况；
4.系统性分析调节性T细胞和Th17细胞在支气管哮喘中的失衡表达机制，为深入了解其发病机理提供实验依据。
六、参考文献
1.LuTX,LimYJ,WenL,etal.(2010).“TheimpactofageonTh17cellresponseinmurinesystemiclupuserythematosus”.Arthritis&Rheumatism,62(4):1291-1302.
2.MiossecPandKollsJK.(2012).“TargetingIL-17andThi-17cellsinchronicinflammation”.NaturereviewsDrugdiscovery,11(10):763-776.
3.RobinsonDSandO’GarraA.(2002).“Th2cytokinesandallergicinflammation:roleinpathogenesisandexperimentalmodels”.Immunologyreviews,179(1):59-77.