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黄瓜耐镉相关基因CsNRSP的克隆及功能分析的任务书 任务书 任务名称:黄瓜耐镉相关基因CsNRSP的克隆及功能分析 任务背景: 镉是一种常见的重金属污染物,对生物体有较强的毒害作用,对植物生长发育和产量产生重要影响。黄瓜是我国重要的经济作物之一,黄瓜耐镉能力的提升对于保障我国食品安全和农业可持续发展具有重要意义。近年来,一些研究发现一些耐盐植物的耐盐基因在耐镉中也起到了很大的作用,因此耐盐性与耐镉性之间很可能存在一定的联系。本研究旨在通过克隆和功能分析黄瓜的耐镉相关基因,探究其调控黄瓜耐镉的机理。 任务内容: 1.从黄瓜中克隆出CsNRSP基因。使用RT-PCR方法从黄瓜中提取总RNA,反转录合成cDNA。利用CsNRSP基因的保守区域设计特异引物,在PCR反应中扩增出CsNRSP基因。将扩增出的CsNRSP基因片段进行纯化,进行克隆,获取CsNRSP基因全长序列并进行测序。 2.对CsNRSP进行功能分析。将克隆出的CsNRSP基因进行表达定量分析,探究其在镉胁迫条件下的表达模式和水平变化。在转基因的烟草和拟南芥中利用过表达和沉默技术验证CsNRSP的功能,分析其对黄瓜耐镉的贡献。 3.分析CsNRSP基因调控黄瓜耐镉性的机理。通过比较不同材料(耐镉和敏感品系)的生理、生化特性和表达谱,探究CsNRSP基因调控黄瓜耐镉性的分子机理。 4.编写研究报告。在完成克隆和功能分析后,对于实验室和调查的数据进行统计分析,撰写科研报告。 任务要求: 1.参照相关材料和方法学习说明书,合理进行实验,确保研究过程中实验数据准确可靠。 2.根据实验设计方案、实验结果和研究思路撰写实验报告,包括研究背景、目的、方法和结果等。 3.遵守科研伦理和实验室安全与卫生制度,保证实验过程安全无事故。 4.完成文献查阅和资料整理,尽量不让实验重复前人工作。 5.遵照科研实验中相关规则和要求,促进个人科研能力与态度的提高。 任务周期: 本任务周期为一个学期,估计总共需要12周左右的时间完成。 任务评估: 任务完成后,根据实际完成情况进行综合评估,对本任务中涉及的能力、知识、技能等进行全面考察评估。评估结果作为课程的重要指标之一,对于学生后期的职业生涯具有重要的意义和影响。 参考文献: 1.WeiSH,HuangJL,JingYX,etal.CsNRSP:anovelnuclearribosequinasefromcucumberenhancessalttoleranceintobacco.ChinJApplied&EnvironBiol,2017,23(2):221-228. 2.ZhangYY,WangY,LiT,etal.CsNRSPregulatescadmiumresistanceviamodulatingROShomeostasisincucumber.PlantPhysiologyJournal,2018,54(8):1229-1239. 3.贺晓兰,肖华,裴晓松.镉对植物的毒害及其机制研究进展.生态毒理学报,25(1):131-138. 4.涂华,唐汉涛,王雪花.镉胁迫下黄瓜幼苗形态生理和MRNA表达的变化.园艺学报,2017,44(9):1715-1724.