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拟南芥内质网胁迫应答中转录因子NAC103的功能分析的任务书 任务书 研究题目:拟南芥内质网胁迫应答中转录因子NAC103的功能分析 研究背景: 内质网是细胞重要的蛋白质合成和修饰的场所,同时是细胞胁迫应答中的重要信号源。许多胁迫条件会引起内质网压力(ERstress),如缺乏营养、氧气不足、药物诱导等。ERstress的发生会诱导一系列的信号通路的激活,包括转录因子、翻译后修饰和解聚酶等。其中,NAC(NAM,ATAF1/2,andCUC2)转录因子家族在拟南芥中是内质网压力应答的重要因子。 在拟南芥中,NAC103是一种内质网压力应答中重要的转录因子,它可以直接结合到内质网压力应答元素(UPRE)并在胁迫下转录下游基因。此外,NAC103还参与了植物的生长发育调节、环境适应和光合作用等生理过程。 研究意义: 通过分析NAC103的功能,可以更深入的了解植物在胁迫应答中的机制以及其参与调节的复杂性。同时,对于探究拟南芥在生长、发育和环境适应等方面的分子机制有重要的指导意义。 研究内容: 1.NAC103的鉴定和分选与不同胁迫条件下的表达变化情况的解析。 通过PCR扩增等方法将NAC103从拟南芥中克隆出来,并进行测序分析,获得全长cDNA序列。利用qRT-PCR等技术方法,分析不同胁迫条件下NAC103的表达情况,例如在高温、低温、渗透压等胁迫下NAC103的表达变化情况。 2.NAC103的序列分析 通过对NAC103的序列进行分析,探究其在转录调控中的作用机制,进一步了解NAC103对植物生长、发育和环境应答的调节机制。 3.NAC103的表达定位和功能分析 通过荧光素酶报告基因系统或转录后翻译技术,确定NAC103在拟南芥中的分布位置,进一步研究其对转录调控的作用机制。通过转基因技术构建过表达或RNAi下调NAC103的拟南芥植株,分析其在胁迫应答和生长发育过程中的作用和功能。 研究方法: 主要采取分子生物学、生物信息学、基因克隆、转基因技术、蛋白质技术等手段对拟南芥NAC103进行功能分析。 研究进度安排: 第一年: 1.NAC103的鉴定和分选。 2.对不同胁迫条件下NAC103的表达变化进行分析。 3.NAC103的序列分析与对其在转录调控中的作用机制探究。 第二年: 1.NAC103的表达定位和功能分析。 2.建立过表达或RNAi下调NAC103的拟南芥植株。 3.观察NAC103参与植物生长发育和胁迫应答机制的调节作用。 参考文献: 1.Liu,J.X.,Howell,S.H.(2010)Endoplasmicreticulumproteinqualitycontrolanditsrelationshiptoenvironmentalstressresponsesinplants.PlantCell,22,2930?2942. 2.Chen,Q.,Qi,W.B.,Reiter,R.J.,Wei,W.,Wang,B.M.(2018)ExcessiveMelatoninImpairsMitochondrialBioenergeticsandAltersTranscriptionalResponsestoOxidativeStressinArabidopsis.PlantPhysiol,176,00230.2018. 3.Zhang,Y.,Liu,X.,Liu,Y.,Kang,L.,Wang,X.,Liang,C.(2018)ZmPDF1AnegativelyregulatesdroughtandsalttoleranceinZeamays.FrontPlantSci,9,288. 4.Jiao,Y.,Xu,W.,Duan,Z.,Bai,X.,Chen,M.,Zhang,M.,Jin,Z.,Zhang,S.,Xiao,G.,Li,X.,etal.(2019)Genome-wideidentification,evolution,andexpressionanalysisofRNA-bindingproteinPCFS4inPopulustrichocarpa.FrontPlantSci,10,379.