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拟南芥转录因子AtOFP8在干旱胁迫下的功能分析的任务书 任务书 一、研究背景 气候变化导致全球环境发生了明显的变化,其中干旱现象尤为突出。干旱是影响植物生长发育和产量的重要环境因素,同时也促使植物适应环境变化并发生一系列分子生物学上的调控响应。 拟南芥(Arabidopsisthaliana)是植物学研究中广泛用于进行分子生物学和分子生态学研究的模式植物,它的基因组已被完全测序且生物学研究工具比较完备。近年来的研究发现,拟南芥一些转录因子在干旱胁迫下发生了表达调控,如MYB、WRKY和bHLH家族等。 之前的研究发现,拟南芥中的AtOFP8(ArabidopsisthalianaOBEREAUERENUEEICHINGERENUEODERKLEINEBLATTERE8)基因在多个生物过程中发挥了重要的调控作用,但其在干旱胁迫下的作用尚未明确。因此,本研究拟探究AtOFP8在干旱胁迫下对拟南芥生长发育的调控作用及其机制。 二、研究目的 通过对AtOFP8表达进行干旱诱导和干旱恢复处理,分析其在干旱胁迫下的表达模式,并探究其参与拟南芥生长发育的调控机制。 三、研究内容 1.构建干旱胁迫处理系统 根据聚合酶链式反应(PCR)技术,克隆AtOFP8基因及其启动子区域,构建干旱胁迫处理系统。 2.生长及干旱处理 采用拟南芥Col-0品系作为试验材料,生长于生长室中。通过测定土壤水分含量确定植物进行干旱处理的时间和程度,然后对干旱处理和干旱恢复处理的植物进行采样和分析。 3.AtOFP8的表达模式及干旱诱导响应分析 收集干旱胁迫后植物样本,并通过qRT-PCR技术对AtOFP8的转录水平进行分析,并通过烟草亲和层析技术(YeastTwoHybrid)方法和质谱分析试图鉴定AtOFP8的互作蛋白质。 4.AtOFP8的功能分析 利用基因敲除技术及外源转基因筛查技术对AtOFP8功能进行研究,盆栽条件下依次分别测量干重、叶面积、根系大小、相对含水量和抗氧化系统酶活性等生长发育相关指标,并对所得数据进行统计分析。 5.AtOFP8在干旱调控过程中可能参与的途径和信号转导机制的初步探究 通过基因沉默技术和分子生物学方法,分析干旱抗性相关基因的表达,研究AtOFP8在干旱调控过程中的可能途径和信号转导机制。 四、预期结果 通过此次研究,我们可以预期得到以下结果: 1.AtOFP8在干旱处理过程中可能会发生表达变化,其具体表达模式与机理可以得到初步鉴定; 2.AtOFP8对干旱处理条件下拟南芥生长发育的影响及其机制可以被初步鉴定; 3.可能得出AtOFP8在干旱调控过程中的可能途径和信号转导机制的初步探究结果; 4.该研究成果可对拟南芥应对干旱胁迫的分子调控机理提供新的认识和研究基础。 五、参考文献 1.Shangguan,L.F.,&Chang,J.L.(2018).ArabidopsisWRKY75transcriptionfactorcontributestodroughtstresstoleranceintransgenictobaccoplants.PlantScienceJournal,36(4),376-386. 2.Vatansever,R.,Filiz,E.,Eroğlu,S.,&Aktas,H.(2017).PhysiologicalandmolecularresponsesofArabidopsisthalianatonanoparticulateCeO2stressunderdryconditions.JournalofPlantGrowthRegulation,36(2),531-542. 3.Wu,T.,Zhang,D.,&Liu,M.(2018).TheArabidopsisC3H14andC3H15Zinc-FingerProteinsNegativelyRegulateSaltStressToleranceinABA-DependentPathways.PlantScienceJournal,36(3),288-298.