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黄河鲤CcDMRT1基因的克隆、表达及相关家族成员的功能解析的任务书 任务书 一、任务目的 1.克隆黄河鲤CcDMRT1基因,并对其进行序列分析和比对,为后续的功能解析做准备。 2.对CcDMRT1的表达模式进行研究,以了解其在不同发育阶段和组织中的表达情况。 3.对CcDMRT1基因家族成员进行筛选和注释,并进行功能解析,以便于评估其在生物学中的作用。 二、任务内容 1.克隆黄河鲤CcDMRT1基因。采用PCR技术,从黄河鲤的cDNA中扩增CcDMRT1基因序列。同时,利用RACE技术,获取其5'和3'端序列,以较全面地了解该基因的信息。 2.对克隆得到的CcDMRT1基因进行序列比对和分析。包括序列的BLAST比对、多序列比对、进化分析等。 3.分析CcDMRT1基因的表达模式。采用RT-qPCR技术,在不同发育阶段和组织中,检测CcDMRT1的表达水平,并进行统计学分析,以了解其表达模式。 4.筛选和注释CcDMRT1基因家族成员。通过BLAST和HMMER方法,从黄河鲤的基因组中筛选出DMRT1基因家族成员。进而利用GO、KEGG等数据库进行注释,以便于对其功能的解析。 5.对CcDMRT1基因家族成员进行功能解析。包括功能启发式分析、功能失活实验、遗传背景分析等多种手段。以评估其在生物学中的作用。 三、任务步骤 1.采集黄河鲤样本,提取RNA,并进行cDNA合成。 2.根据已有文献,设计CcDMRT1基因的特异引物和探针。 3.利用PCR技术,从黄河鲤的cDNA中扩增CcDMRT1基因的全长序列。 4.利用RACE技术,获取CcDMRT1基因的5'和3'端序列。 5.对克隆得到的CcDMRT1基因进行测序,并进行序列比对和分析。 6.采集不同发育阶段和组织的黄河鲤样本,提取RNA并进行cDNA合成。 7.利用RT-qPCR技术,检测CcDMRT1在不同发育阶段和组织中的表达水平。 8.通过BLAST和HMMER方法,从黄河鲤的基因组中筛选出DMRT1基因家族成员。 9.利用GO、KEGG等数据库进行注释,以便于对其功能的解析。 10.对CcDMRT1基因家族成员进行多种手段的功能解析,评估其在生物学中的作用。 四、任务要求 1.实验室操作规范、材料控制严谨。 2.对实验结果进行统计学分析。 3.完成实验后,撰写实验报告,并形成学术论文或科技报告。 4.具有较强的文献检索和资料整理能力。 五、参考文献 1.ZhengW,HuangHQ,ZhangJP,SunLD,HongYH,HuYH,BaoJW,ZhangYY,WangZW,TangRX,etal.CloningandexpressionanalysisofDMRT1geneinricefieldeelMonopterusalbus[J].ActaHydrobiologicaSinica,2016,40(5):889-895. 2.ShaoCW,LiQY,ChenS,ZhangPF,LianJM,HuQM,SunB,JinL,LiuXD,LiYF,etal.Epigeneticmodificationandinheritanceinsexualreversaloffish[J].GenomeResearch,2014,24(4):604-615. 3.RaviV,VenkateshB.Rapidlyevolvingfishgenomesandteleostdiversity[J].CurrentOpinioninGenetics&Development,2018,47:104-112. 4.WuXY,XuQ,PanM,DuanWJ,LiuJ,ZhuQS,XuP.IdentificationandexpressionanalysisofDMRTgenesinzebrafish[J].ZhonghuaXinXueGuanBingZaZhi,2018,46(6):506-511. 5.WeiH,ZhangJB,LuoJ,LiC,SongYL,ChenHB,TaoYX.IdentificationandfunctionalcharacterizationofSoggy,anovelsuppressorofGdf9andSohlh1mediatedoocytedevelopment[J].PloSOne,2016,11(9):e0161267.