阿托伐他汀对人外周血培养内皮祖细胞数量及功能的影响的任务书.docx

阿托伐他汀对人外周血培养内皮祖细胞数量及功能的影响的任务书
任务书
1.研究背景
阿托伐他汀是一种常用的降脂药物，具有降低血脂和改善血管内皮功能等多种作用。除此之外，阿托伐他汀也被证明具有抗炎、抗氧化、抗血小板聚集等作用。人体血管内皮细胞是毛细血管和小动脉血管内面的细胞，它们对血管系统的正常功能有着重要的作用。研究发现，内皮细胞受到多种因素的影响，如高血压、高血脂、糖尿病、吸烟等，会导致内皮细胞损伤与功能障碍，从而引发多种心血管疾病。因此，研究阿托伐他汀对人外周血培养内皮祖细胞（EPC）数量及功能的影响，对于深入了解其机制、探寻其可能的临床应用具有重要的理论和实践意义。
2.研究目的
本次研究旨在探究阿托伐他汀对人外周血培养EPC数量和功能的影响，深入探讨其机制，为其临床运用提供实验基础。
3.研究内容
（1）建立人外周血EPC的培养体系
选取健康志愿者外周血，采用分离培养法将EPC分离提取，建立EPC的体外培养体系。
（2）阿托伐他汀作用下EPC的数量变化
分别在不同浓度的阿托伐他汀处理下，采用MTT法、倒置显微镜等方法检测EPC数量的变化。
（3）阿托伐他汀作用下EPC的增殖、迁移和管腔生成能力的变化
利用MTT法、细胞增殖试剂盒，伤口愈合实验，背景血管生成实验等方法检测EPC增殖、迁移和管腔生成能力的变化。
（4）对阿托伐他汀作用下EPC的凋亡情况进行分析
采用AnnexinV-FITC/PI双染实验和流式细胞术对阿托伐他汀处理下EPC的凋亡情况进行分析。
（5）使用Westernblot检测下游转录因子及相关受体蛋白表达情况
使用Westernblot对EPC内的下游转录因子及相关受体蛋白进行检测，探究阿托伐他汀作用下的机制。
4.研究方法
（1）实验器材：分离培养蛋白、MTT检测试剂盒、AnnexinV-FITC/PI双染试剂盒、细胞增殖试剂盒、Westernblot试剂盒等。
（2）实验流程：
①采集外周血样本分离培养EPC，确保EPC异质性。
②根据EPC的生长速度，挑选合适的时间段进行细胞培养。
③将EPC分别进行不同浓度的阿托伐他汀处理。
④使用MTT法、倒置显微镜等检测EPC数量及径向迁移能力，使用流式细胞术检测EPC凋亡情况。
⑤使用Westernblot检测下游转录因子及相关受体蛋白表达情况。
（3）数据处理方法：使用SPSS18.0软件进行统计学分析，结果以均值±标准差（mean±SD）表示。采用t检验或方差分析等方法进行数据的比较与验证，P＜0.05认为差异有显著性。
5.研究意义
本次研究旨在探究阿托伐他汀对人外周血EPC数量与功能的影响，深入探讨其机制及其临床应用的潜力。研究结果有助于促进阿托伐他汀临床应用的探索，为临床治疗提供新策略，从而改善心血管疾病的治疗效果。考虑到该研究需要基础和实验室的技术支持，以及实验室准备所需的复杂样品，需要严格遵循实验流程，保证结果的真实可靠。