辛伐他汀对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化的影响的任务书.docx

辛伐他汀对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化的影响的任务书
任务书
题目：辛伐他汀对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化的影响
任务背景：
骨质疏松性骨折是一种常见的老年人骨质疾病，其治疗一直是临床医生面临的难题。BMSCs是体内各种骨细胞祖细胞的源头，成骨分化实验是目前评价骨细胞祖细胞能力的重要方法。近年来，研究发现辛伐他汀（simvastatin）具有促进BMSCs成骨分化的作用。因此，本任务旨在探讨辛伐他汀对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化的影响。
任务内容：
1.建立骨质疏松性骨折大鼠模型。选择SD大鼠，行双腿坐位位姿骨折术建立骨质疏松性骨折模型。
2.分组治疗。按照随机数字表法将大鼠分为模型组、辛伐他汀组、生理盐水组，分别口服辛伐他汀或生理盐水，观察6周后各组的临床表现和骨组织学形态学变化。
3.采用体外培养方法分离骨髓间充质干细胞（BMSCs），并分别在不同浓度的辛伐他汀和生理盐水作用下进行成骨分化实验，观察BMSCs形态学变化及calciumdeposition变化情况。并通过检测ALP、Runx2、COL1、OPN等分子的表达水平，探讨辛伐他汀对BMSCs成骨分化的机制。
4.对实验结果进行统计学分析，并进行结果讨论。分析辛伐他汀是否对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化产生了影响，其机制是什么。
任务计划：
第一周：文献调研
1.查阅相关文献，阅读骨质疏松性骨折的研究和辛伐他汀的作用机制等方面的文献。
2.分析已有研究的不足，并针对任务内容确定实验思路和技术路线。
第二周：试验前准备
1.训练大鼠骨折术和体外培养技术；
2.查找购买所需药物和试剂。
第三周：建立骨质疏松性骨折模型
1.选择同龄健康的SD大鼠，进行手术前储备；
2.行双腿坐位位姿骨折术建立骨质疏松性骨折模型。
第四周：组织学观察
1.观察大鼠的临床表现并进行分组；
2.执行口服辛伐他汀或生理盐水；
3.术后观察大鼠骨组织学形态学变化。
第五周：体外培养
1.采集大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）；
2.使用不同浓度的辛伐他汀和生理盐水作用于BMSCs并分别进行ALP活性和calciumdeposition的检测；
3.采用RT-qPCR和Westernblotting检测成骨分化相关基因的表达水平。
第六周：统计学分析与结果讨论
1.对实验结果进行统计学分析；
2.分析辛伐他汀是否对大鼠骨质疏松性骨折及BMSCs成骨分化产生了影响，其机制是什么。
3.撰写实验报告。
任务要求：
1.要求实验手续合理，数据真实可靠；
2.要求结果客观具有学术价值，并得出一定结论；
3.要求实验报告流畅、准确、详实。
参考文献：
1.G.Xiao,V.Gopalakrishnan,C.Xian,etal.AnEssentialRoleforStat1intheOsteoblasticDifferentiationProgram.MolecularandCellularBiology,2004,24(15):6516-6529.
2.H.Wang,Y.Wan,Y.Li,etal.SimvastatinPromotesOsteoblastViabilityandDifferentiationViaRas/Smad/Erk/BMP-2SignalingPathway.ChineseJournalofCellBiology,2008,30(4):363-370.
3.Y.Guo,H.Li,Z.Xie,etal.SimvastatinPromotestheOsteogenesisofRatBoneMarrow-DerivedMesenchymalStemCellsbyUpregulatingBMP-2Expression.ActaBiochimicaetBiophysicaSinica,2012,44(3):220-228.