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达沙替尼联合AKT抑制剂对kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响的任务书
任务书
题目：达沙替尼联合AKT抑制剂对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响
摘要：达沙替尼是一种针对BCR-ABL融合蛋白的小分子酪氨酸激酶抑制剂，在慢性骨髓性白血病治疗中取得了成功。AKT作为PI3K/AKT信号通路中的关键组分，在许多癌症中扮演着重要的角色。本研究旨在探讨达沙替尼联合AKT抑制剂对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响，并寻找治疗急性骨髓性白血病的有效途径。
一、背景
急性骨髓性白血病（acutemyeloidleukemia,AML）是一种由幼稚的淋巴骨髓细胞引起的癌症。尽管有许多药物和治疗方法可用于治疗AML，但该疾病经常出现耐药现象和复发。达沙替尼是一种小分子酪氨酸激酶抑制剂，已经被证明在慢性骨髓性白血病等癌症的治疗中具有良好的疗效（Kantarjianetal.,2006）。此外，AKT作为PI3K/AKT信号通路中的关键组分，在多种癌症中扮演着重要的角色。由于AKT经常出现过度激活，导致细胞增殖和生存的异常（Testaetal.,2019），因此，抑制AKT可能是治疗AML的一种有效途径。
二、研究问题
由于AML和慢性骨髓性白血病具有不同的患者人群，因此现有的慢性骨髓性白血病治疗方案可能不适用于AML患者。因此，本研究的目的是探索达沙替尼联合AKT抑制剂对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响，并寻找治疗急性骨髓性白血病的有效途径。
三、研究方法
1.材料及试剂
Kasumi-1细胞系（中国科学院血液学研究所）
达沙替尼（SelleckChemicals）
AKT抑制剂(perifosine)(SelleckChemicals)
MTT试剂盒(Sigma-Aldrich)
Trypsin-EDTA解离液(Gibco)
体外培养基RPMI1640(Gibco)
佐剂FBS(Gibco)
Penicillin/Streptomycin(HyClone)
2.Kasumi-1细胞培养
将Kasumi-1细胞以RPMI1640培养基和10%火烧血清FBS（v/v）以及Penicillin/Streptomycin混合的体外培养基中培养。在37°C、100%湿度和5%CO2条件下，定期更换培养基。
3.MTT实验
将Kasumi-1细胞以RPMI1640培养基和10%火烧血清FBS（v/v）以及Penicillin/Streptomycin混合的体外培养基中培养至对照组和实验组细胞密度达到1×10^4个/孔。对照组添加等量的培养基，实验组添加检测药物（达沙替尼、AKT抑制剂）溶液。24,48和72小时后，用MTT试剂检测细胞的生长与代谢活性，并计算存活的细胞数。通过测定波长为490nm的吸光度来分析减少的细胞数量。
4.细胞生存率和增殖检测
MTT试验中，我们测量了Kasumi-1细胞的生存在不同时间点和药物浓度下。通过比较活细胞和对照组细胞计算细胞增殖率。
5.细胞凋亡检测
将Kasumi-1细胞培养24小时后，添加不同浓度的达沙替尼和AKT抑制剂。24小时后，将细胞进行染色，在荧光显微镜下观察细胞形态的变化及细胞的凋亡情况。
6.数据分析
使用图表生成器在Excel中绘制图表，使用SPSS统计软件对数据进行统计分析，并使用Origin9.0绘制各种曲线与直方图。
四、预期结果
本研究将通过Kasumi-1细胞系推测达沙替尼和AKT抑制剂对AML患者的治疗效果。预计达沙替尼联合AKT抑制剂可显著降低Kasumi-1细胞的增殖，增加Kasumi-1细胞的凋亡率，从而为治疗急性骨髓性白血病提供新的疗法。
五、研究意义
本研究将寻找治疗急性骨髓性白血病的有效途径，为临床治疗提供一种新的治疗策略并提高患者的治疗效果和生存率。