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灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒免疫增强作用的研究的任务书 任务书 研究题目:灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒免疫增强作用的研究 研究背景: 随着社会的发展和人们的生活水平提高,人们对健康的关注度也逐渐增加。免疫系统作为人体抵抗疾病的重要防线,其强弱直接影响着人体对于外部病原体的抵抗力。近年来,随着对天然药物及其医疗保健作用的关注和研究,灵芝因其独特的药理作用和治疗多种疾病的功效,引起了研究人员的广泛关注。然而,由于灵芝多糖等具有强烈生物活性的成分在生物体内的含量极低,大大限制了其医疗应用的广泛性和效果。因此,开发一种新型灵芝多糖载体,提高灵芝多糖和脂质立方液晶纳米粒水溶性、免疫增强功能,是当前急需解决的重要问题。 研究目的: 探究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒在体外体内的免疫增强作用,并从分子水平和微观结构角度探究其作用机制。 研究内容: 1.灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒的制备及相应物化性质的表征。 2.体外免疫增强效果的测试:构建适当的体外试验体系,研究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒对于T、B细胞的增殖和分泌干扰素等细胞因子的影响。 3.体内免疫增强效果的测试:构建适当的小鼠免疫缺陷病模,研究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒对小鼠免疫功能的影响,并监测小鼠体内相关免疫指标的变化。 4.从分子水平和微观结构角度探究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒的作用机制,研究其与免疫细胞的相互作用。 研究方法: 1.制备灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒:采用超声法和乳化剂法,制备灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒,采用动态光散射仪、透射电镜和Zeta电位分析仪等方法进行相应物理特性分析。 2.体外免疫增强效果的测试:分离倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8及MTT法检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附实验检测细胞因子分泌情况。 3.体内免疫增强效果的测试:建立小鼠免疫缺陷病模,采用流式细胞术分析CD3、CD4、CD8、CD19等免疫细胞及细胞因子的数量、分布情况等。 4.从分子水平和微观结构角度探究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒的作用机制,采用原子力显微镜、荧光共振能量转移法和核磁共振法等手段,探究其与免疫细胞的相互作用。 研究意义: 灵芝多糖载体在提高药物水溶性、生物利用度方面具有重要意义,脂质结构的载体与纳米粒物理特性相似,能够大幅提高灵芝多糖的稳定性,从微观结构角度解释灵芝多糖对于人体免疫系统的强化作用,具有深刻的生物医学意义。 研究计划: 本研究计划周期3年,分为以下几个研究阶段: 第一年:对灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒的制备及相应物化性质的表征进行研究。 第二年:研究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒在体外的免疫增强作用。 第三年:研究灵芝多糖脂质体和脂质立方液晶纳米粒在体内的免疫增强作用,并探究其作用机制。 参考文献: 1.Zhao,J.,Yang,P.,Li,Y.,Li,Y.,Ji,G.,Xie,J.,&Li,X.(2017).EvaluationoftheimmuneactivitiesofanisolatedpolysaccharideextractedfromGanodermalucidum.Internationaljournalofbiologicalmacromolecules,96,592-598. 2.He,X.,Wang,X.,Fang,J.,Chang,Y.,Ning,N.,Guo,H.andHuang,L.(2017).Thestructureandantitumoractivityofanewβ-D-glucanfromGanodermalucidum.CarbohydratePolymers,157,pp.227-234. 3.Song,J.,Hu,Q.,Huang,X.,Chen,Z.,Zhang,Y.,&Song,Z.(2016).AnalysisofpolysaccharidesinGanodermalucidumsporesbyRamanmicrospectroscopycoupledwithdifferentialcentrifugalsedimentation.JournalofRamanSpectroscopy,47(7),853-858.