弓形虫MORN12基因缺失株的构建及其免疫保护性研究的任务书.docx

弓形虫MORN12基因缺失株的构建及其免疫保护性研究的任务书
任务书
一、任务背景
弓形虫（Toxoplasmagondii）是一种广泛存在于人和动物体内的肠道寄生虫，可以引起弓形虫病（toxoplasmosis），具有广泛的传播性和致病性。弓形虫病对人类、畜禽养殖业和野生动物等都造成了很大的危害，因此研究弓形虫的生物学特性和致病机制具有重要的意义。
MORN12是弓形虫的一种重要膜蛋白，可以通过调节细胞分裂和纤毛形成等过程发挥重要的生物学功能。近年来的研究表明，弓形虫MORN12基因缺失株可以被作为弓形虫纯化亚单位疫苗，用于预防弓形虫病。因此，建立弓形虫MORN12基因缺失株和研究其免疫保护性具有重要的科学意义和应用前景。
二、任务目标
1.构建弓形虫MORN12基因缺失株。
2.筛选弓形虫MORN12基因缺失株并对其进行鉴定。
3.研究弓形虫MORN12基因缺失株在细胞分裂、纤毛形成等方面的生物学特性。
4.对弓形虫MORN12基因缺失株进行免疫保护性研究。
三、任务内容和要求
1.构建弓形虫MORN12基因缺失株：选取适当的分子生物学手段，构建弓形虫MORN12基因缺失株。必须确保构建的株系稳定可靠。
2.筛选弓形虫MORN12基因缺失株并进行鉴定：采用PCR技术、Westernblot技术或其他鉴定方法，对弓形虫MORN12基因缺失株进行筛选和鉴定。
3.研究弓形虫MORN12基因缺失株在细胞分裂、纤毛形成等方面的生物学特性：针对弓形虫MORN12基因缺失株，开展相关的细胞生物学实验，探究其在细胞分裂、纤毛形成等方面的生物学特性。
4.对弓形虫MORN12基因缺失株进行免疫保护性研究：将弓形虫MORN12基因缺失株作为疫苗，用来预防作为实验对象的小鼠的弓形虫感染。通过比较实验组和对照组的感染率和生存率等指标，评价弓形虫MORN12基因缺失株的免疫保护效果。
四、实验计划
1.构建弓形虫MORN12基因缺失株（第一年）：
（1）设计合适的引物，利用CRISPR-Cas9系统进行弓形虫MORN12基因的敲除。
（2）获得弓形虫MORN12基因敲除株，并通过PCR、Westernblot等方法进行鉴定和筛选。
2.研究弓形虫MORN12基因缺失株的生物学特性（第二年）：
（1）通过细胞实验等方法，研究弓形虫MORN12基因缺失株在细胞分裂、纤毛形成等方面的生物学特性。
3.对弓形虫MORN12基因缺失株进行免疫保护性研究（第三年）：
（1）将弓形虫MORN12基因缺失株作为疫苗，用于预防小鼠的弓形虫感染。通过比较实验组和对照组的感染率和生存率等指标，评价弓形虫MORN12基因缺失株的免疫保护效果。
五、预期成果
1.成功构建弓形虫MORN12基因缺失株，该株系的有效性和稳定性得到证明。
2.发表相关研究论文2篇以上，其中一篇以上为SCI论文。
3.对弓形虫MORN12基因缺失株的免疫保护性进行深入研究，为弓形虫纯化亚单位疫苗的开发提供新的思路和实验支持。
六、预算
本实验总预算为20万，其中购买实验器材和耗材费用为12万，人员工资费用为8万。
七、参考文献
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