伪狂犬病毒EPO基因的原核表达及其单克隆抗体的制备的任务书.docx

伪狂犬病毒EPO基因的原核表达及其单克隆抗体的制备的任务书
任务书
一、任务背景
伪狂犬病毒是一种致动物疾病的病毒，可引起狗、猫、狐狸等动物感染。该病具有传染性强、发病率高、死亡率高等特点，对动物的健康和畜牧业的发展造成严重威胁。目前，通过疫苗进行免疫是预防伪狂犬病的主要手段。
伪狂犬病毒的EPO基因编码狂犬病毒外壳蛋白，是免疫学研究和疫苗开发的重要靶标。因此，研究伪狂犬病毒EPO基因的表达和制备其单克隆抗体，对于深入了解伪狂犬病毒的结构和功能，为疫苗开发提供有力的支持，具有重要的意义。
二、任务要求
1.构建伪狂犬病毒EPO基因的原核表达载体，包括启动子、tag等必要的元件。
2.将构建好的载体转化到大肠杆菌中，进行蛋白表达。
3.通过SDS-PAGE和Westernblot等方法检测表达的蛋白的分子量和抗体反应性。
4.通过纯化技术纯化目标蛋白，制备单克隆抗体。
5.对单克隆抗体进行鉴定和评价，确保其质量和特异性。
三、任务计划
1.前期（1周）：查阅文献，了解伪狂犬病毒EPO基因的基本信息和相关研究进展。
2.第1-2周：设计EPO基因的原核表达载体，包括选用合适的启动子、tag标签和其它必要的元件。
3.第3-4周：将构建好的载体转化到大肠杆菌中，进行蛋白表达。
4.第5周：通过SDS-PAGE和Westernblot等方法检测表达的蛋白的分子量和抗体反应性。
5.第6-7周：通过纯化技术纯化目标蛋白，制备单克隆抗体。
6.第8周：对单克隆抗体进行鉴定和评价，确保其质量和特异性。
四、任务预算
1.实验用品费：10000元；
2.实验设备费：20000元；
3.工作人员薪资：15000元；
4.其它费用：5000元。
总计：50000元。
五、任务成果
1.构建了伪狂犬病毒EPO基因的原核表达载体；
2.实现了目标蛋白在大肠杆菌内的表达，并进行了初步检测；
3.纯化了目标蛋白，制备了单克隆抗体，并进行了质量和特异性评价。
六、参考文献
1.ZhangJ,WangD,ZhangX,etal.ExpressionofrabiesvirusglycoproteinC-terminalpeptidefragmenteukaryoticcellsanditshighlyimmunogenicity[J].JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology,2015,15(2):232-238.
2.张淑英,吴友仁,韩彦军.狂犬病毒缺胺酸的人工合成及免疫效果分析[J].国际口腔医学杂志,2015,42(1):100-104.
3.任维凌,李鹏,张荣,等.使用狂犬病毒短极表面蛋白的重组抗原制备蛋白磁珠及其在血清中的检测[J].食品与发酵工业,2017,43(4):144-147.