microRNA在不可预见慢性轻度应激大鼠模型海马组织中表达变化的实验研究的任务书.docx

microRNA在不可预见慢性轻度应激大鼠模型海马组织中表达变化的实验研究的任务书
任务书
背景
随着现代社会的快节奏生活，人们经常承受各种各样的慢性轻度应激，例如长时间的工作压力、家庭纷争、社交压力等。这些应激状态通常不会直接导致明显的身体疾病，但如果长期持续下去，可能会对神经系统和心理健康产生巨大的影响。因此，研究应激对神经系统的影响机制，对于预防和治疗许多神经和心理疾病都具有重要的意义。
microRNA(miRNA)是一类小分子非编码RNA，它可以调节基因表达、蛋白质合成和翻译等过程。过去的研究表明，在神经系统的发育直至成年期、生物钟和记忆形成等过程中，miRNA参与了复杂的神经网络和信号传递系统。同时，一些研究还表明，应激状态下，miRNA的表达可能会发生变化，并且这些变化可能会引起神经细胞的异常死亡和氧化应激等病理学改变。但是，目前关于慢性轻度应激对小鼠海马区miRNA表达的影响机制还不清楚。
本次实验的目的是探究慢性轻度应激状态下小鼠海马区中miRNA的表达变化，并进一步研究这些变化如何影响神经细胞的生存和功能。
任务
1.动物处理
选取健康雄性Sprague-Dawley小鼠20只，随机分为两组：实验组和对照组。实验组小鼠将被暴露在慢性轻度应激状态下，对照组小鼠将继续正常进食、睡眠和活动。
在第一周中，实验组小鼠将每天被置于电击通道中，经过100毫秒的电击刺激以及60秒的恢复期，重复10次。在接下来几周中，实验组小鼠将经常被暴露在噪声环境下（100分贝），每天持续2小时，一共持续4周时间。对照组小鼠将在标准实验室条件下生活。
2.海马取样
在实验结束后，将所有小鼠安乐死，并立即进行海马组织的取样。将海马区取出并立即储存于液氮中，以便后期实验处理。
3.RNA提取和测序分析
使用Trizol方法分别从实验组和对照组小鼠海马组织中提取总RNA，并回转录为cDNA。
利用Illuminanext-generation测序平台，测定实验组和对照组中miRNA的表达情况。将miRNA-seq数据进行质量控制和数据清理后，利用不同软件将差异表达的miRNAs筛选出来，并对不同ially表达的miRNAs进行GO功能和pathway分析，找出生物学过程和通路。
4.神经元培养和Apoptosis检测
将小鼠海马区神经元培养在培养基中，添加不同ially表达的miRNAs处理。随后，使用比色法和组织化学染色等方法检测神经元的凋亡情况，并进行统计和分析。
预期结果：
1.通过测序分析，我们将发现一些慢性轻度应激状态下小鼠海马区中miRNA的表达发生变化的候选miRNAs。
2.经过生物信息学分析，我们将发现这些miRNAs与神经系统中重要的生物学过程和通路有关。
3.经过神经元培养实验，我们将证实其中一些miRNAs可以影响神经细胞的死亡和功能，这将有助于进一步解释慢性轻度应激对神经系统的影响机制。
总体来说，我们希望通过本次实验，能够进一步了解慢性轻度应激状态下小鼠海马区中miRNA表达的变化，并全面解释它们如何影响神经细胞的生存和功能。这将为预防和治疗不同的神经和心理疾病提供新的线索。