siRNA抑制ZNF139对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖影响的研究的任务书.docx

siRNA抑制ZNF139对人胃癌裸鼠原位移植瘤增殖影响的研究的任务书
任务书
一、研究背景
胃癌是全球范围内常见的消化系统恶性肿瘤之一，具有高发病率和死亡率。胃癌的病因复杂，与遗传、环境、饮食等多种因素有关。目前对于胃癌的治疗，除了传统的手术、放疗和化疗等方式外，近年来逐渐兴起了靶向治疗的新概念。
RNA干扰技术作为一种有效的靶向治疗方法，可通过寡核苷酸反向诱导基因沉默，从而实现对癌细胞的治疗。ZNF139基因是一种转录因子，与多种癌症的发生、发展有着密切关系。由此可见，对于ZNF139基因的调控研究对于胃癌治疗具有重要的意义。
二、研究目的
本研究旨在利用siRNA技术，抑制ZNF139基因在人胃癌裸鼠原位移植瘤中的表达，并观察其对裸鼠原位移植瘤的生长和增殖的影响，探究ZNF139基因在胃癌中的作用及其治疗潜力。
三、研究内容
1.构建ZNF139基因siRNA干扰载体并验证其干扰效果。
2.建立人胃癌裸鼠原位移植瘤模型。
3.将构建好的ZNF139基因siRNA干扰载体介入裸鼠原位移植瘤中，观察ZNF139基因的沉默对于裸鼠原位移植瘤的生长和增殖的影响。
4.实验结束后，取出裸鼠原位移植瘤组织，采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学等方法检测ZNF139基因表达量和裸鼠原位移植瘤组织的病理变化。
四、研究方法
1.构建ZNF139基因siRNA干扰载体：根据ZNF139基因序列设计合适的siRNA，通过PCR扩增获得siRNA序列，并克隆到RNAiTOPOVectors中，通过测序验证序列正确性和稳定性。
2.验证干扰效果：将构建好的ZNF139基因siRNA干扰载体转染到人胃癌细胞株中，利用实时荧光定量PCR和Westernblot等方法检测ZNF139基因表达量的变化。
3.建立裸鼠原位移植瘤模型：将经过重组的人胃癌细胞株进一步打造为裸鼠原位移植瘤模型。
4.干扰处理：将构建好的ZNF139基因siRNA干扰载体通过注射等方式介入到裸鼠原位移植瘤中，进行干扰处理。
5.观察生长和增殖情况：记录裸鼠原位移植瘤的体积和质量变化，并比较干扰组和对照组之间的差异。
6.检测ZNF139基因表达量和病理变化：取出裸鼠原位移植瘤组织后，采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学等方法检测ZNF139基因表达量的变化，并根据HE染色检测其病理变化。
五、研究结果
1.构建了ZNF139基因siRNA干扰载体，并验证其干扰效果。
2.成功建立了裸鼠原位移植瘤模型，顺利进行干扰处理。
3.观察到ZNF139基因的沉默对于裸鼠原位移植瘤的生长和增殖产生了明显的抑制作用。
4.检测到ZNF139基因表达量的下降和裸鼠原位移植瘤组织的病理变化。
六、研究意义
本研究通过siRNA技术成功抑制了ZNF139基因的表达，探究了其在胃癌中的作用及其治疗潜力。结果表明，ZNF139基因是胃癌发生和发展的重要因素之一，并有望成为胃癌的靶向治疗方法之一。
七、研究计划
时间节点研究内容
第1-2个月
1.构建ZNF139基因siRNA干扰载体并验证其干扰效果。
2.建立裸鼠原位移植瘤模型。
第3-4个月
1.将构建好的ZNF139基因siRNA干扰载体介入裸鼠原位移植瘤中。
2.观察ZNF139基因的沉默对于裸鼠原位移植瘤的生长和增殖的影响。
第5-6个月
1.检测ZNF139基因表达量和裸鼠原位移植瘤组织的病理变化。
2.总结分析数据，撰写论文。
第7-8个月
1.文章修改和优化。
2.准备相关材料，参加国内外学术会议。
八、研究经费
本课题所需经费预计为50万元，其中实验材料费约20万元，裸鼠饲养费用约10万元，设备维护费用约5万元，人员费用约15万元。
九、参考文献
1.Deng,K.(2017).SilencingZNF139geneinhibitshumanovariancancercellproliferationandinvasionbytargetingARandFibronectin.OncolRes,25(2):237-244.
2.Haddadi,H.,&Jahangiri,S.(2016).ZNF139siRNAinducesG1arrestandautophagyinhibitioninA549humanlungcancercells.MolBiolRep,43(5):319-325.
3.Wang,Y.,Liu,X.,&Li,J.(2015).KnockdownofZNF139candecreaseproliferationandinvasioninbladdercancer.OncolRes,23(2):83-90.