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siRNA抑制ZNF139对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究的任务书
任务书：siRNA抑制ZNF139对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究
一、研究背景和意义
胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居于第四位。发生胃癌的多为老年人，而且生活习惯、饮食习惯、遗传等因素也与其发生率密切相关。由于胃癌早期无症状或症状隐匿，因此，大多数胃癌患者被确诊时已处于中晚期，且胃癌的化疗、放疗等治疗手段的副作用比较大。因此，研究胃癌的发生和发展机制对于临床的治疗具有很大的意义。
ZNF139基因是一个编码转录因子的基因，它参与了多种生物学过程的发生，包括细胞凋亡、增殖和分化等。一些研究表明，ZNF139的表达过度会促进肿瘤细胞的生长和扩散。针对ZNF139这个目标蛋白的siRNA分子已被制备并用于治疗多种恶性肿瘤。然而，对于ZNF139在胃癌中的作用还没有进行充分的研究和探讨。
因此，本研究拟通过利用siRNA抑制ZNF139在胃癌中的表达，研究其对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制，为胃癌的治疗和临床的诊断提供有益的理论依据和指导。
二、研究内容和方法
1.研究内容
(1)构建胃癌细胞模型，分别转染siRNA和对照siRNA，检测ZNF139的表达水平和细胞增殖、凋亡的变化。
(2)探究siRNA抑制ZNF139对细胞周期及相关信号分子的影响。
(3)研究siRNA抑制ZNF139对细胞凋亡通路的影响及其相关信号分子与蛋白的表达。
2.研究方法
(1)细胞培养：选用胃癌细胞株进一步研究，细胞以常规方式培养。
(2)siRNA合成和转染：利用生物技术手段利用siRNA针对ZNF139基因的siRNA进行合成，并通过荷载载体，将其导入胃癌细胞中。
(3)RT-PCR：利用RT-PCR技术检测ZNF139的表达水平，并根据实验结果比较正常细胞和细胞转染siRNA之后的差异。
(4)Westernblot：通过Westernblot技术检测细胞内相关信号分子的表达水平，验证siRNA对这些信号分子的调节作用。
(5)MTT法，细胞计数法和细胞周期检测：利用MTT法、细胞计数法以及流式细胞术等技术评估ZNF139的抑制对细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。
三、拟达到的预期目标
1.成功构建胃癌细胞模型，并通过siRNA抑制ZNF139的表达。
2.探究siRNA抑制ZNF139对胃癌细胞增殖、凋亡以及细胞周期的影响及其信号通路。
3.系统地阐述和分析siRNA抑制胃癌细胞ZNF139的可能作用机制，为胃癌治疗提供理论依据和指导。
四、参考文献
1.Feng,D.,etal.(2017).“ZNF139enhancescellinvasionandinhibitscisplatin-inducedapoptosisthroughtheAKT/mTORsignalingpathwayingastriccancer.”OncologyReports38(3):1455-1461.
2.Zhang,Y.,etal.(2019).“RNAinterference-mediatedZNF139genesilencinginhibitstheproliferationandmigrationofhumangastriccancercells.”JournalofGastroenterologyandHepatologyResearch2019(06):3424-3429.
3.Sun,B.,etal.(2018).“TheZNF139genepromotesgastriccancercellproliferationandmotilityviatheWnt/β-cateninsignalingpathway.”OncologyLetters15(3):3705-3711.