131I标记抗胃泌素释放肽前体单链抗体scFv的实验研究的任务书.docx

131I标记抗胃泌素释放肽前体单链抗体scFv的实验研究的任务书
任务书
一、研究背景和意义
胃泌素释放肽前体（proGRP）是一种新型的肿瘤标志物，特别与小细胞肺癌分泌相关。目前，临床使用的proGRP检测方法主要是酶联免疫吸附法（ELISA），但该方法在灵敏度和特异性方面存在一定的局限性。因此，研发一种更为灵敏、特异性更高的方法来检测proGRP是非常有必要的。
单链抗体（single-chainantibody，scFv）是一种新型的抗体分子，具有小分子量、高亲和力、高特异性和较好的稳定性等特点。因此，将131I标记的scFv与proGRP相结合，可以用于检测proGRP的含量，从而实现早期诊断和治疗。
本研究的任务是将131I标记的scFv与proGRP结合，进而在invitro和invivo实验中验证其灵敏度、特异性、稳定性等性能，为临床应用打下基础。
二、研究内容和方法
（一）制备131I标记的scFv
采用茵曼-苏黎世亲和（imidazole-zinc）柱层析法从大肠杆菌中提取scFv。通过免疫亲和法培育scFv，接着将其与131I标记，最终通过GE低分子量透析柱纯化得到131I标记的scFv。
（二）制备proGRP
采用大肠杆菌发酵获得的纯化proGRP。
（三）检测131I标记的scFv对proGRP的结合能力
采用ELISA方法检测131I标记的scFv与proGRP的结合能力。将proGRP打在聚丙烯试管表面，再添加不同浓度的131I标记的scFv，根据比色反应分析结合能力的强弱。
（四）确定131I标记的scFv对proGRP的特异性
采用Westernblotting的方法检测131I标记的scFv对不同分子量的蛋白质具有的辨识度。
（五）评价131I标记的scFv在小鼠体内的分布和稳定性
将131I标记的scFv静脉注射小鼠体内，通过SPECT/CT检测小鼠各器官内的放射性分布。同时，在不同时间点采血检测其血药浓度，评价其稳定性。
（六）检测131I标记的scFv在小鼠胚胎发育和免疫反应中的影响
在小鼠胚胎发育和免疫反应中，检测131I标记的scFv的影响。
三、研究计划
本研究计划时间12个月。
第1-3个月：制备131I标记的scFv和proGRP。
第4-6个月：检测131I标记的scFv对proGRP的结合能力和特异性。
第7-9个月：评价131I标记的scFv在小鼠体内的分布和稳定性。
第10-11个月：检测131I标记的scFv在小鼠胚胎发育和免疫反应中的影响。
第12个月：撰写实验报告和整理数据分析。
四、预期成果
完成本研究后，预计会获得以下成果：
（一）制备131I标记的scFv和proGRP。
（二）确定131I标记的scFv对proGRP的特异性和稳定性。
（三）评价131I标记的scFv在小鼠体内的分布和稳定性。
（四）验证131I标记的scFv在小鼠胚胎发育和免疫反应中的安全性。
（五）为临床应用提供基础和参考。