理学现代生物技术细胞工程.pptx

第一节细胞工程的基本原理一、细胞工程的内容细胞工程二、发展史二、发展史三、细胞工程的基本操作1、无菌操作技术无菌操作2、细胞培养技术3、细胞融合技术四、细胞培养技术1、微生物细胞培养1）培养基的组成1）培养基的组成1）培养基的组成1）培养基的组成1）培养基的组成1）培养基的组成2）培养基的种类2）培养基的种类3）培养方法2、植物细胞培养2、植物细胞培养2、植物细胞培养2、植物细胞培养2、植物细胞培养2、植物细胞培养2、植物细胞培养常用的细胞固定化培养系统3、动物细胞培养3、动物细胞培养3、动物细胞培养3、动物细胞培养五、细胞融合技术五、细胞融合技术五、细胞融合技术五、细胞融合技术五、细胞融合技术五、细胞融合技术五、细胞融合技术作业第二节植物细胞工程植物细胞工程一、植物组织培养离体的植物器官、组织或细胞二、植物细胞培养三.植物细胞杂交（细胞融合）植物A细胞作业第三节动物细胞工程第三节动物细胞工程动物细胞工程第三节动物细胞工程（1）原代培养：以动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织为材料，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，放入培养瓶中，在培养箱中培养。
（2）传代培养：随着细胞的生长和增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液动物细胞有关动物细胞培养的几个问题（1）动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？血清是一种很好的营养物质，含
有动物体细胞生长所需要的营养物质，并给动物创造了生活环境。（2）为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？（3）为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？贴壁生长动物细胞培养技术的应用二、动物细胞融合细胞A用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程动物细胞融合的意义诱导动物细胞融合的方法动物细胞融合最重要的用途抗原长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。（1）提出问题：从动物血清中分离抗体的方法产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏单克隆抗体制备过程：本过程利用了免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活单克隆抗体的应用目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。小结三、细胞核移植技术多莉羊的培育过程采用此方法可以将两个不同种、属的动物优点集中在一起，产生具有双亲优点的可繁殖的杂种动物。克隆动物的研究意义四、动物的胚胎移植（1）激素促多排卵
（2）体外受精
（3）培育胚胎
（4）胚胎激素处理
（5）胚胎植入母体胚胎移植技术①植物组织培养是植物细胞工程技术的基础。
②动物细胞培养是各种动物细胞工程技术的基础。
③为达到特定的目的，许多细胞工程技术往往需要同时运用。作业第四节微生物细胞工程一、微生物原生质体融合微生物原生质体融合（一）微生物原生质体融合的优势（一）微生物原生质体融合的优势（一）微生物原生质体融合的优势（二）微生物原生质体融合的基本步骤（2）原生质体制备（3）原生质体再生（3）原生质体再生影响再生的因素④再生培养基组成
碳源，稳定剂、细胞壁提取物都会影响再生率
⑤残存菌体的分离
残存菌体必须分离除去
⑥原生质体密度
密度不能过大，否则先长出的菌落抑制后生长的菌落。
⑦再生培养基上的冷凝水
影响渗透压，平板干燥
⑧再生方法
不宜涂布，双层平板法

（4）诱导融合和再生（三）微生物原生质体融合的应用（三）微生物原生质体融合的应用二、原核细胞的原生质体融合革兰氏阳性菌细胞融合的过程革兰氏阴性菌细胞融合的过程三、真菌的原生质体融合二、真菌的原生质体融合作业