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cmvIL-10的表达纯化及初步功能研究的中期报告
本研究旨在表达纯化并初步探究cmvIL-10的功能。
1.表达纯化
首先，我们在E.coli中克隆了cmvIL-10的基因，并将其插入表达载体中。经过转化和培养后，我们发现目标蛋白在E.coli中表达出现问题，大部分蛋白无法溶解或部分残缺。因此，我们转而使用哺乳动物细胞表达系统。
我们将cmvIL-10基因插入真核表达载体中，并将其转染至HEK293T细胞中。通过Westernblot和SDS-PAGE分析，我们成功地检测到目标蛋白的表达并进行了初步纯化。我们使用葡萄糖亲和层析纯化，将目标蛋白从其他细胞组分中分离出来，并进一步提高其纯度。最终，我们获得了一定量的纯cmvIL-10。
2.初步功能研究
为了初步了解cmvIL-10的功能，我们进行了以下实验：
2.1.细胞增殖抑制实验
我们培养了两组人类细胞株：一组不带cmvIL-10基因，另一组则转染了cmvIL-10基因。通过MTT实验，我们发现转染cmvIL-10的细胞组的增殖速率明显低于未转染组，证明cmvIL-10具有一定的增殖抑制作用。
2.2.细胞凋亡实验
我们进一步探究cmvIL-10的作用机制，发现转染cmvIL-10基因的细胞中，细胞凋亡率明显提高。这表明cmvIL-10可能通过促进细胞凋亡来抑制细胞增殖。
综合以上实验结果，我们初步认为cmvIL-10可能是一种增殖抑制剂，并能通过促进细胞凋亡来实现其生物学功能。但是，对于cmvIL-10的具体作用机制和与细胞信号通路的关系仍需进一步研究，这将是我们接下来的重要研究方向。