治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的影响的任务书.docx

治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的影响的任务书
任务书
一、研究背景：
肝缺血再灌注损伤(Hepaticischemia-reperfusioninjury,HIRI)是一种普遍存在于体外肝脏切除、移植、门脉高压和ABCDE复苏等多种临床情况下的常见并发症。HIRI会导致肝脏细胞功能衰竭、再生能力下降和组织结构变性等，对肝脏功能恢复和机体免疫反应产生重要影响。治疗性高碳酸血症(TherapeuticHypercapnia,TH)则是指利用吸入呼吸机控制二氧化碳（CO2）浓度的方法达到缓解细胞缺氧、抑制自由基反应、改善器官功能、减轻机体应激反应的治疗方法。
二、研究目的：
本研究旨在探究TH治疗对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的影响及其机制。
三、研究内容：
1.建立移植肝缺血再灌注模型，将大鼠随机分为移植肝缺血组、缺血再灌注组和TH治疗组。
2.分别测定各组大鼠的肝功能(Portalveinpressure和肝酶水平)、氧化应激水平(MDA、SOD、GSH-PX的活性和NO的含量)、炎症反应、细胞凋亡（肝细胞TUNEL染色和细胞周期分析）以及肝脏组织病理学变化。
3.统计数据并进行统计学分析，探究TH治疗对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的影响及机制，探究其对肝移植术后的影响。
四、研究意义：
本研究将探讨TH治疗对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用及机制。旨在为开展保护性移植肝术后治疗提供理论和实验依据，并且为移植肝手术的成功率和患者的生存率带来有益的启示。
五、研究方法：
1.实验动物与组织采集：
本研究选用体重在250~300g之间的2-3月龄雄性SD大鼠，采用自体血流灌注肝移植技术建立肝缺血再灌注模型，行肝顶静脉切断缺血40min再灌注2h。
2.分组及处理：
移植肝缺血组(donor的慢性缺血+80minreperfusion+接受者)=正常移植组；
缺血再灌注组(肝微血管扼流+40minreperfusion)=简短缺血/再灌注组；
TH治疗组(肝微血管扼流+40minreperfusion+TH)=短暂加压治疗组。
3.实验分析：
各组大鼠需在影响结果的12h内接受肝组织采样，并用HE染色、免疫组化、TUNEL染色对各组大鼠进行组织学分析。同时应用光镜、电镜、ELISA、RT-qPCR以及Westernblotting分析肝移植术后的肝功能损伤、氧化应激、炎症反应等指标的变化。
4.统计分析：
应用SPSS20.0软件进行数据处理和统计分析，数据比较采用单因素方差分析或非参数检验。
六、研究进度计划：
1.前期准备阶段：文献资料查阅（1个月）
2.动物处理阶段：动物饲养及手术（2个月）
3.数据采集阶段：分组实验和数据采集（1个月）
4.结果分析阶段：数据分析及结果整理（1个月）
5.论文撰写阶段：论文撰写及稿件修改(2个月)
定稿时间：6个月
七、参考文献：
1.TúlioPNavarroetal.Therapeutichypercapniaprotectslivergraftsfromischemia-reperfusioninjuryandimprovesthepost-operativeoutcome[J].Clinics(SaoPaulo).2017Dec28;72(12):758-767.
2.NagpalDetal.RoleofHypercapniaintheIntensiveCareUnit.WorldJCritCareMed.2014Nov4;3(4):85-93.
3.ShenJZetal.Mechanismandpreventionofliverischemia-reperfusioninjury[J].HepatobiliaryPancreatDisInt.2017Apr;16(2):167-180.
4.李健民等.肝病学[M].北京:人民卫生出版社,2019.
5.张家全等.国家临床重点专科消化病学[M].人民卫生出版社,2019.