EZH2负调控抗病毒天然免疫信号通路的机制研究的任务书.docx

EZH2负调控抗病毒天然免疫信号通路的机制研究的任务书
任务书
题目：EZH2负调控抗病毒天然免疫信号通路的机制研究
背景与意义
病毒感染一直是人类健康领域的重大问题，尤其是近年来爆发的新型冠状病毒（COVID-19）疫情，更是让人类认识到病毒造成的威胁和挑战。维持机体免疫稳态，抗病毒是机体天然免疫反应的重要组成部分，而抗病毒天然免疫反应的启动和调节则依赖于一系列信号传递通路和相关分子。EZH2是一种组蛋白甲基转移酶，参与调控基因转录和表达，具有多种生物学功能。近年来，越来越多的研究发现EZH2对天然免疫反应具有调控作用，可因感染病毒而升高，其调节抗病毒反应的机制不断深入探索。了解EZH2对抗病毒天然免疫信号通路的负调控机制，有助于深入揭示机体抗病毒免疫反应的调控机制，为病毒感染治疗提供新的靶点和策略。
研究内容
本研究旨在系统探究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路的负调控机制，具体任务包括以下几个方面：
1.确定EZH2与抗病毒天然免疫信号通路分子的相互作用：利用生物信息学分析，筛选EZH2可能与抗病毒天然免疫信号通路分子相互作用的靶点，并通过共免疫沉淀和贡献酶（Co-IP）实验，进一步证实EZH2与其靶点的相互作用关系。
2.探究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路分子的甲基化修饰：利用线粒体表达，酶学分析及ChromatinImmunoprecipitation(CHIP)技术等方法，研究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路靶点的甲基化修饰及其对其功能的影响。
3.研究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路的调控作用：利用siRNA、CRISPR/Cas9等基因编辑技术，构建EZH2敲除细胞系或稳定表达EZH2的细胞系，研究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路的调控作用，特别是抗病毒相关基因的表达和活性等方面的影响。
4.确定EZH2在抗病毒天然免疫反应过程中的作用：利用体内外模型研究EZH2参与病毒感染后天然免疫反应的调控作用和作用机制，揭示EZH2在抗病毒天然免疫反应中的具体作用位置和作用机制，为进一步深入开展相关研究奠定基础。
计划与进度
本研究计划周期为两年，主要研究内容和进度安排如下：
第一年
1-6个月：文献调研、生物信息学分析进行EZH2可能与抗病毒天然免疫信号通路分子相互作用的靶点筛选；
7-9个月：共免疫沉淀和Co-IP实验进一步筛选EZH2与其靶点的相互作用关系以及甲基化修饰情况；
10-12个月：利用线粒体表达、酶学分析及CHIP技术等方法研究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路靶点的甲基化修饰及其对其功能的影响。
第二年
1-6个月：利用siRNA、CRISPR/Cas9等基因编辑技术，构建EZH2敲除细胞系或稳定表达EZH2的细胞系，研究EZH2对抗病毒天然免疫信号通路的调控作用；
7-12个月：利用体内外模型研究EZH2参与病毒感染后天然免疫反应的调控作用和作用机制，揭示EZH2在抗病毒天然免疫反应中的具体作用位置和作用机制，完成实验研究并撰写研究论文。
经费预算
本研究人员组成为2名硕士研究生和1名导师，总经费预算为10万元。其中，实验耗材费用预计为6万元，设备使用费用预计为2万元，实验室相关费用预计为1万元，交通差旅费和会议费用预计为1.5万元，论文发表和版面费用预计为0.5万元。
参考文献
1.郝庆彬，吕诗雨.EZH2在肿瘤免疫逃逸中的作用.人类疾病评价，2018，25（6）：450-453.
2.GaoL,etal.EZH2repressestargetgenesthroughH3K27-dependentandH3K27-independentmechanismsinhepatocellularcarcinoma.BMCCancer,2018,18(1):390.
3.LiY,etal.EZH2incancerprogressionandpotentialapplicationincancertherapy:afriendorfoe?IntJMolSci,2018,19(4):1177.