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GCS和MDR1在白血病细胞多药耐药形成中相关性的研究的任务书 任务书 项目名称:GCS和MDR1在白血病细胞多药耐药形成中相关性的研究 背景: 多药耐药是指肿瘤细胞对多种化疗药物产生耐受性。它是当前治疗白血病等恶性肿瘤面临的主要难题之一。多药耐药的形成是一个复杂的过程,其中GCS和MDR1两种基因在其中起着非常重要的作用。 问题: 在白血病细胞多药耐药的形成中,GCS和MDR1之间是否存在相关性? 目的: 通过分析GCS和MDR1基因在多药耐药形成过程中的表达变化及其相关机制,探索二者在白血病细胞多药耐药形成中的相关性,为临床治疗提供一定的理论依据。 研究内容: 1.收集白血病患者的骨髓细胞、外周血细胞和髓外白血病细胞,并提取其总RNA。 2.用qRT-PCR检测GCS和MDR1基因及其蛋白的表达水平,在正常白细胞和白血病细胞之间进行比较。 3.对白血病细胞进行多药耐药筛选,分别检测耐药和非耐药白血病细胞的GCS和MDR1基因及其蛋白的表达水平。 4.用siRNA或CRISPR-Cas9等方法靶向GCS和MDR1基因,研究其对白血病细胞多药耐药的影响。 5.利用fluorescence-activatedcellsorting(FACS)检测耐药和非耐药白血病细胞中GCS和MDR1的变化,观察其降低化疗药物敏感性的机制。 6.通过Westernblotting和immunohistochemistry(IHC)检测GCS和MDR1蛋白在白血病细胞和正常白细胞中的表达差异,探究二者可能存在的相关性。 7.建立小鼠白血病移植模型,将GCS和MDR1基因敲入或敲出,考察其对小鼠白血病细胞多药耐药的影响。 8.对实验结果进行统计学分析,揭示GCS和MDR1在多药耐药形成中的相关性。 预期成果: 1.揭示GCS和MDR1基因在白血病细胞多药耐药形成中的作用机制和相关性,为新型治疗手段的发展提供依据。 2.提供一些新的观察模板和方法,这些方法可以用于未来医学研究的其他领域,从而更好地理解多药耐药。 3.扩大我们对白血病细胞多药耐药形成中GCS和MDR1基因功能的认识,为白血病多药耐药治疗提供有力的理论支持。 参考文献: 1.DeanM,RzhetskyA,AllikmetsR.TheHumanATP-BindingCassette(ABC)TransporterSuperfamily.GenomeResearch.2001;11(7):1156–1166. 2.NohEK,LeeYJ.Proteomicanalysisofacquireddrugresistancemechanismsincisplatin-resistanthumanlungadenocarcinomacellsusingtwo-dimensionalgelelectrophoresis.JournalofProteomeResearch.2009;8(5):2346–2360. 3.LiC,XuY,WangW&etal.TheRoleofGlucosylceramideinOvarianCancerDrugResistance.JournalofCellularPhysiology.2018;233(8):6043-6052. 4.ZhaiB,ZhangH,WangX&etal.AXLisanovelpredictivefactorandtherapeutictargetforradioactiveiodine-refractorythyroidcancer.Oncotarget.2015;6(29):29654-29671.