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renalase基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达的中期报告
一、背景
肾素-血管紧张素系统（RAAS）是维持体液平衡和血压稳定的重要系统之一，其主要作用机制是通过肾素释放出来的血管紧张素II收缩血管，同时也会刺激肾上腺素素的分泌，促进心脏收缩和血管收缩。而近年来，研究发现了一种新的具有调节血压作用的蛋白质，即肾素的缩酶。其主要功能是将肾素缩短成为肾素酶，从而降低血管紧张素的水平，放松血管，降低血压。
在2010年，美国佛罗里达州立大学的科学家团队发现了一种新的蛋白质，称为renalase。它是由一种新的基因编码的酶，具有促进尿酸的代谢和调节肾上腺素效应等多种作用。同时，研究人员还发现renalase的缺失与高血压、糖尿病等代谢性疾病有关。
二、研究目的
本研究的目的是克隆renalase基因，并在大肠杆菌中表达，以便进一步研究其生化特性及生理作用。
三、研究方法
1、克隆renalase基因
通过序列比对，设计引物扩增出renalase基因的cDNA序列，并进行PCR扩增。将扩增后的cDNA产品克隆到pET-28a载体中，构建表达质粒。
2、表达renalase基因
将得到的含有renalase基因的表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中，进行组织培养和诱导表达。将其超声破碎，离心，得到基因表达产物。
3、纯化和鉴定产物
将上述产物经过层析柱、电泳和Westernblotting等方法进行纯化和鉴定。
四、研究进展及结果分析
克隆renalase基因并用于大肠杆菌中的表达，得到了基因表达产物并进行了初步的纯化和鉴定。本研究的下一步将进行这些产物的更深入的生化特性分析，并探究其在高血压、糖尿病等代谢性疾病中的作用机制。
综上所述，本研究初步完成了renalase基因的克隆及在大肠杆菌中的表达，为进一步研究其功能和生化特性奠定了基础。