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病原微生物实验室的消毒与灭菌消毒和灭菌是保护操作人员和环境不被病原微生物污染和感染的重要环节实验室生物危害废物示例消毒和灭菌的基本原则:适用于所有已知不同类别的病原微生物清除污染的特殊要求:根据实验工作类型以及所操作的感染性物质的特性来决定提供的一般性资料:可用于各病原微生物实验室建立标准和操作程序,以处理特定实验室中所涉及的生物危害 清洁 清洁剂 消毒 消毒剂/抗菌剂 灭菌 灭菌剂/杀菌剂/化学灭菌剂 化学方法 物理方法基本概念3.抗菌剂(antimicrobial) 能够杀灭或去除微生物或抑制其生长和繁殖的制剂 4.消毒剂(disinfectant) 用于杀灭微生物的化学品或化学混合物,但不一定杀灭孢子,消毒剂常用于非生命物体或其表面 5.化学杀菌剂(chemicalgermcide) 用于杀灭微生物的化学品或化学混合物6.灭菌剂(microbicide) 能够杀灭微生物的化学品或化学混合物,其杀灭细菌芽孢的能力达到灭菌水平的称为灭菌剂。 7.防腐剂(antiseptic) 能够抑制微生物生长和繁殖但不足以杀灭的化学物质基本概念消毒与灭菌的方法使用方法: 刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿墩布擦洗 严重污染的物品会影响除污染剂的杀菌作用,不能被迅速地消毒或灭菌;许多杀菌剂只对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。 注意!!! 预清洁时必须谨慎,以避免暴露于感染性物质; 必须使用与以后使用的杀菌剂化学上相容的物质; 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒; 是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定清洁化学消毒方法防止过度使用消毒剂!包膜病毒 (如:HSV,CMV,RSV,HIV)消毒剂种类(按标签说明使用)常用化学灭菌剂的性能比较常用化学灭菌剂的安全性及特征(一)表面消毒(1)氯(次氯酸钠)2)有效氯浓度(2)次氯酸钙注意事项(3)二氯异氰尿酸钠(4)氯胺(5)二氧化氯常规含氯消毒剂的推荐使用浓度2.酒精3.戊二醛4.过氧乙酸5.季胺盐类化合物(二)空气熏蒸甲醛物理方法二.高压蒸汽灭菌和其他加热灭菌消毒(一)压力饱和蒸汽灭菌(高压蒸气灭菌)1.预真空式高压灭菌器预真空式高压灭菌器(双门互锁)2.重力置换式(“下排气式”)高压蒸汽灭菌器3.燃料加热压力锅式高压灭菌器燃料加热压力锅式高压灭菌器4.脉动真空蒸汽内循环高压灭菌器脉动真空蒸汽内循环高压灭菌器(二)高压蒸汽灭菌器的装载压力蒸汽灭菌包内化学指示卡/条(三)高压蒸汽灭菌质量保证的生物指标(四)高压灭菌器使用注意事项(四)高压灭菌器使用注意事项影响清除污染效果的因素 处理剂量 微生物污染的程度 温度 湿度 酸碱度 化学拮抗物质 穿透条件 表面张力三.焚烧四.HEPA过滤HEPA滤器更换程序实验室消毒灭菌的应用清除局部环境污染2.房间和仪器污染的清除生物安全柜污染的清除☆研究试剂溢漏或泼洒后,立即清除污染物及污染的表面 ☆在更换HEPA过滤器或内部维修之前,必须对已用于感染性材料工作的生物安全柜进行消毒 ☆在生物安全柜维护、更换过滤器、以及性能测试或重新安置之前,必需消毒 ☆最普通的气体消毒方法:甲醛熏蒸 ☆推荐将安全柜一直维持运行状态。如果要关闭的话,则应在关机前运行5min以净化内部的气体。 生物安全柜甲醛熏蒸消毒的基本程序3)确保生物安全柜排风管道的气密性(关闭风阀); 4)为能够紧急排出甲醛,以及在生物安全柜旁预先放置一根软管,其必须与排风装置相连 5)加热设备放置于工作台面,多聚甲醛均匀分布在加热设备的加热表面上 6)在生物安全柜内的另一加热装置盛放中和试剂(NH4HCO3或相当的产品),密闭,与安全柜中的空气隔绝,以免熏蒸时发生中和作用。 7)封闭生物安全柜的工作区开口,如电线出口、观察窗连接处等等 8)接通加热装置的电源(生物安全柜外) 9)在多聚甲醛完全蒸发时拔掉插头以断电,使生物安全柜静置至少6h。10)给放有第二个加热装置通电,使碳酸氢铵蒸发。然后拔掉电插头,接通生物安全柜电源两次,每次启动约2秒钟让碳酸氢铵气体循环。在移去前封闭板(或塑料布)和排气口罩单前,应使生物安全柜静置30min。 11)使用前应擦掉生物安全柜表面上的残渣。 实验室中要张贴如何处理溢出物的实验室操作规则, 每一位实验室的成员均需阅读并理解这些规程 在生物安全柜中发生有生物学危害的物品溢出时,应在安全柜处于工作状态下立即进行清理。 要使用有效的消毒剂,并在处理过程中尽可能减少气溶胶的生成。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压蒸汽灭菌。生物安全柜污染的清除废物的处理谢谢