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第三章消毒与灭菌消毒灭菌有关概念 1消毒:指杀死病原菌,但不包括芽胞。用以消 毒的化学药物称为消毒剂。 2灭菌:是指杀灭物体上所有微生物 3无菌:物品中没有活的微生物存在,称无菌。 4防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。 同一种化学药品在高浓度时为消毒剂, 低浓度为防腐剂第一节物理消毒灭菌法 消毒、灭菌的方法一般可分为: 热力灭菌法 辐射杀菌法 物理学方法滤过除菌法 超声波杀菌法 干燥和低温抑菌法等 化学方法 一热力灭菌法 分类:干热和湿热灭菌法两类 1干热灭菌法 A焚烧: B烧灼: C干烤: D红外线:2.湿热灭菌法 A巴氏消毒法:61.1-62.8℃经30min,或 71.7℃经15-30秒钟,常用于 消毒牛乳和酒类等 B煮沸法:水温100C经5min能杀死一般细菌 的繁殖体。芽胞要煮沸1-2h。 C流通蒸气法:10OC,蒸15-30min,可杀死 细菌的繁殖体,但不能杀死芽胞 D间歇灭菌法:10OC,蒸15-30min,或75-80℃ 30-60min,每日一次,连续三日, 也可达到灭菌的目的 E高压蒸气灭菌法:是最有效的灭菌法。通常在 1.05kg/cm锅内温度可达121.3C, 维持15-30min,即可达灭菌目的湿热与干热灭菌效果的比较湿热比干热灭菌好的原因: 1细菌蛋白质在有水的情况下易于 凝固变性 2湿热穿透力强 3湿热蒸气有潜热存在,水蒸气凝固 成水释放潜热,迅速提高被灭菌物 体的温度二辐射杀菌法 1紫外线: 机理:其波长在200-300nm有杀菌作用,其中以265-266nm最强,这与细菌DNA吸收光谱一致。细菌DNA吸收紫外线后,使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶共价结合成二聚体,改变了DNA的分子构型,干扰了DNA的复制和转录,导致细菌变异或死亡 作用:用于不耐热物体表面和空气消毒。对人体皮肤、眼睛有损伤作用,使用时应注意防护 2电离辐射:包括X射线和γ射线 机制:这些射线可将原子或分子放出电 子变成离子。如水分子电离可产生H+和OH-, 这些离子有很强的还原与氧化作用,能直接 杀伤细菌;也可与液体中的氧分子结合形 成H2O2,从而使细菌损伤或死亡 用途:一次性塑料制品消毒;食品消毒, 不破坏营养成分 3滤过除菌法 机制:是用滤菌器机械过滤的方法将液 体中或空气中的细菌除去 作用:主要用于一些不耐热的血清、毒 素、抗生素,以及空气的除菌4超声波杀菌法 超声波:是不被人耳感受高于20千周/秒的声 波 作用:可裂解多细菌,尤其对G+更敏感 目前主要用于粉碎细胞,提取细胞组 分或制备抗原等5干燥与低温抑菌法 作用:干燥法常用于保存食物,浓盐或糖渍食品可使细菌脱水,造成生理干燥,使细菌生命活动停止。 低温可使细菌新陈代谢减慢,故常用于保存细菌菌种。第二节化学消毒灭菌法 化学消毒灭菌法: 定义:是用化学药品进行消毒的方法。 作用机制; ①使菌体蛋白质变性或凝固, ②破坏细菌的酶系统 ③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通 透性,导致细菌死亡。 一.消毒剂的主要种类、浓度及用途 1酚类: 作用:高浓度使菌体蛋白凝固,低浓度破坏 细菌的细胞膜,使胞质内容物渗出 浓度:石炭酸为2%-5%、来苏为2% 用途:地面、器具表面和皮肤的消毒 2醇类: 作用机制:损伤细胞膜,使菌体蛋白变性, 灭活酶类 浓度:乙醇70%-75% 用途:主要用于皮肤的消毒和体温计等的 浸泡 4氧化剂: 机制: (1)靠氧化作用,灭活酶类 (2)使蛋白质变性 种类和用途: (1)0.1%高锰酸钾,皮肤、尿道、水果等 (2)3%过氧化氢,创伤、皮肤粘膜消毒 (3)2%-2.5%碘酒,皮肤消毒 (4)0.2ppm-0.5ppm氯,饮水和游泳池消毒 (5)10%-20%漂白粉,地面、厕所与排泄物 消毒 5表面活性剂: 机制: (1)损伤细胞 (2)灭活酶类 (3)蛋白质沉淀 种类和用途: (1)0.05%-0.1%新洁尔灭,皮肤粘膜消毒、 浸泡手术器械 (2)0.05%-0.1%杜灭芬,伤口冲洗,金属 器械、塑料、橡皮类消毒 6烷化剂: 机制: 使菌体蛋白和核酸的烷基化 种类、浓度及作用: (1)10%甲醛,物品表面、空气消毒 (2)2%戊二醛,精密仪器、内窥镜等消毒 缺点:对人体有一定的毒性,且有的有致癌 作用,如β-内脂第三节影响消毒灭菌的因素第四章噬菌体第一节噬菌体的生物学性状 概念:噬菌体是感染细菌、真菌、放线 菌或螺旋体的病毒 特点: (1)个体微小、可通过细滤菌器 (2)结构简单,由蛋白质和核酸组成 (3)专性细胞内寄生 (4)复制的方式繁殖 (5)分布广泛 一形态与结构第二节毒性噬菌体2噬菌体的复制周期(溶菌周期)第四节噬菌体的应用