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外源性内皮祖细胞参与裸鼠肝癌血管新生的实验研究的任务书 任务书:外源性内皮祖细胞参与裸鼠肝癌血管新生的实验研究 一、研究背景 肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其预后一直较为严峻。经研究发现,肝癌的恶性程度与其血管新生的程度密切相关。肿瘤血管内皮细胞(EC)具有一些肿瘤特异性标志,是肿瘤新生血管的组成部分,同时能够为肿瘤的生长和转移提供支持。内皮祖细胞(EPCs)能够在血液中自由循环并迁移到血管壁并分化为ECs。因此,想借助EPCs促进血管新生来抑制肝癌的发展成为了一个新鲜的研究方向。 二、研究目的 通过外源性EPCs移植于裸鼠,观察EPCs对于裸鼠肝癌血管新生的影响,为肝癌血管新生的研究提供重要的实验依据和实验数据,为肝癌的治疗提供依据。 三、研究内容 1.裸鼠模型建立:通过人肝癌细胞株移植于裸鼠体内建立肝癌模型,观察肝癌的形态学和基础特性。 2.EPCs培养:通过靶向细胞因子钓获的方法从人外皮嗜酸性粒细胞中分离纯化EPCs,通过无血清培养提供适合的培养环境。 3.EPCs标记:通过营养不良染色或荧光素丙酸酯的标记EPCs,并暴露于亲疏水表面。 4.EPCs移植:通过脾脏注射的方法将标记的EPCs移植于裸鼠体内,观察裸鼠体内的EPCs的分布和扩散情况。 5.免疫组化:在裸鼠肝组织标本中,通过免疫组化检测EPCs在细胞内和细胞外的定位,分析EPCs对于细胞外基质的作用。 6.血管形态学的分析:通过组织学技术检测裸鼠的肝组织血管新生程度,观察肝癌的血管生成情况和血供情况。 四、研究意义 本研究将探索肝癌血管生成的机制和细胞行为,为肝癌的治疗提供重要的实验基础和实验数据。研究结果还将为肝癌的治疗提供新思路和新方向。同时,对于理解EPCs的作用和生物学意义也将有着积极的作用。 五、研究计划与时间安排 1.2022年1月-2022年2月:购买实验所需物品,准备实验仪器和设备。 2.2022年3月-2022年5月:建立肝癌裸鼠模型并检测肝癌的生长情况。 3.2022年6月-2022年7月:培养,标记和移植EPCs,并检测体内EPCs的分布情况。 4.2022年8月-2022年9月:采集实验样品,用免疫组化技术检测肝内EPCs的定位和对于细胞外基质的作用。 5.2022年10月-2022年11月:通过组织学技术检测裸鼠肝组织血管新生程度。 6.2022年12月-2023年1月:数据处理,结果分析和撰写成果报告。 六、研究经费 本项研究所需经费10万元,用于实验所需物品、设备、动物费用、实验室管理和研究人员的工资等。 七、参考文献 1.ShiQ,RafiiS,WuMH,etal.Evidenceforcirculatingbonemarrow-derivedendothelialcells.Blood2006;107:1207-13. 2.BellamyWT.Expressionofvascularendothelialgrowthfactoranditsreceptorsinmultiplemyelomaandotherhematopoieticmalignancies.SeminOncol2001;28:551-9. 3.DanetzJS,HowdieshellTR,CallawayDW,etal.Vascularendothelialgrowthfactorandangiogenesisintheabdomen.JSurgRes2002;102:56-67.