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A型流感病毒分亚型检测蛋白芯片的初步建立的任务书 一、任务背景 A型流感病毒是一种极具传染性的呼吸道病毒,其剧烈的传播速度和强烈的致死率常常引起全球性的流行病暴发事件。A型流感病毒根据其表面抗原的差异被分为多种亚型,其中,H1、H2、H3、N1和N2五种亚型的流感病毒对人类有重要的传播和病毒学意义。目前,对于A型流感病毒的亚型分离和鉴定主要依赖于病毒分离培养、实时荧光定量PCR和血凝试验等技术,这些方法都存在着操作复杂、流程繁琐、耗时长、具有一定的假阳性和假阴性等缺点。 随着高通量生物芯片技术的发展,病原体检测芯片已成为快速、高效、灵敏和经济的病原体检测方法之一,蛋白芯片技术尤其是基于亚型特异性抗原的鉴定具有广泛的应用前景和良好的市场前景。因此,通过建立A型流感病毒分亚型检测蛋白芯片,提高亚型鉴定的准确性和灵敏度,将对广泛的病毒学研究和临床诊断有着巨大的推动作用。 二、任务目的 本次任务旨在建立一种基于A型流感病毒特异性抗原的蛋白芯片,用于快速准确地分型检测A型流感病毒,为病毒学研究和临床诊断提供有力支持。 三、任务内容 1.研究和筛选具有A型流感病毒亚型特异性抗原的蛋白质: (1)筛选包含H1、H2、H3、N1和N2五种A型流感病毒亚型特异性的抗原蛋白质; (2)克隆、表达、纯化目标蛋白质; (3)通过Westernblot检测确保蛋白质的纯度和特异性。 2.构建蛋白芯片基础平台: (1)化学修饰玻片基板,制备蛋白芯片; (2)在芯片基板上印制蛋白质晶阵列,优化晶阵列导入参数; (3)通过表面增强拉曼光谱检测蛋白晶阵列的空间性能和特异性。 3.蛋白芯片检测技术平台优化: (1)设计和优化亚型分型检测的芯片检测方案; (2)系统性优化芯片检测过程中的重要参数如样品处理、检测条件等,确保芯片检测的稳定性和可靠性。 4.测试与评价: (1)用已知类型和数量的A型流感病毒标准样品测试蛋白芯片的检测灵敏度和特异性; (2)用致病性和非致病性的A型流感病毒临床样品测试蛋白芯片的分型鉴定能力; (3)用实时荧光定量PCR法进行对比测试,分析芯片检测的优越性和适用范围。 四、任务周期 本次任务周期为12个月。 五、任务预算 本次任务总预算为¥800,000.00元(人民币),其中包括: (1)材料费:¥300,000.00元,用于购买试剂和仪器等相关物质材料; (2)设备费:¥200,000.00元,用于购买必要的蛋白芯片制备与检测设备; (3)人员经费:¥300,000.00元,用于项目组工作人员的工资和奖金等人员费用。 六、任务管理 本次任务由委托方和承担方在项目合同签署后共同开展,任务遵循技术先进、依法合规、保障安全和规范管理原则。委托方有权对承担方的项目进展和生产情况进行定期检查和审计,并对承担方的项目成果提出合理要求和评价。承担方的任务执行人员应具备较高的科技创新意识和研发能力,承担方应在任务执行过程中遵守相关的法律法规和道德规范,确保任务的完成质量和进度。承担方应及时向委托方提交任务进展情况、成果汇报和技术服务等相关材料。委托方承诺对承担方的技术创新成果进行合法的知识产权保护和利用,为相关成果的市场化转化提供优惠政策和支撑服务。 七、参考文献 1.Wu,L.,etal.(2013).DevelopmentofaMultiplexreal-timePCRAssayfortheRapidDetectionofInfluenzaVirusTypeAIncludingH5andH9Subtypes.Journalofvirologicalmethods187(2):373-380. 2.Wen,W.J.,etal.(2014).IdentificationofPredictiveMarkersforInfluenzaAVirusUsingCorrespondenceAnalysisandDatabaseCorrelationAnalysis.InternationalJournalofMolecularSciences15(12):22351-22366. 3.Wang,C.,etal.(2014).InfluenzaaVirusNucleoproteinActivatestheJNKSignalTransductionPathwaythroughOxidativeStress-inducedProteinTyrosinePhosphorylation.Journalofvirology88(11):5836-5845. 4.Ticha,O.,etal.(2015).DevelopmentandComparativeEvaluationofSYBRGreenI-basedReal-timeRT-PCRAssaysforDetection