预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/3
2/3
3/3

在线预览结束,喜欢就下载吧,查找使用更方便

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

抗栓形成的融合蛋白在毕赤酵母中表达研究的任务书 任务书 一、题目 抗栓形成的融合蛋白在毕赤酵母中表达研究 二、选题背景 抗栓形成的融合蛋白是一种具有抗凝血功能的蛋白质,可以预防血栓的形成。因此,该蛋白质在医学上有着广泛的应用价值,被广泛用于临床预防和治疗血栓相关疾病。但是目前大部分的抗栓形成融合蛋白都是通过基因重组技术在细胞中表达生产的,表达效率不高,且成本较高。因此,在研究抗栓形成融合蛋白在毕赤酵母中表达的过程中,可以更好地解决这些问题。 三、研究目的 本次研究的目的是在毕赤酵母中构建抗栓形成的融合蛋白的表达系统,通过对其表达的研究,探讨毕赤酵母表达技术在抗栓形成融合蛋白生产中的应用。 四、研究内容 1.毕赤酵母表达载体的构建 通过基因重组技术构建抗栓形成的融合蛋白表达载体,包括促进表达该蛋白的启动子、推动该蛋白在毕赤酵母中高效表达的启动子、带有该蛋白的基因序列、选自适应的选择标记基因和氧化还原系统支持元件。 2.毕赤酵母的转化 将构建好的表达载体导入毕赤酵母中,通过筛选得到高效表达的毕赤酵母克隆。 3.蛋白质表达和纯化 对高效表达的毕赤酵母克隆进行蛋白质表达和纯化,利用亲和层析技术、酸性洗脱、分子筛层析或其他方法得到纯化的抗栓形成融合蛋白。 4.蛋白质定量和活性测定 对得到的抗栓形成融合蛋白进行定量测定和活性测定,通过对蛋白质的性质和活性进行分析和比较,探讨毕赤酵母表达技术在抗栓形成融合蛋白生产中的应用。 五、研究方法 1.基因克隆和表达载体构建 2.转化和筛选 3.蛋白表达和纯化 4.蛋白定量和活性测定 六、研究时间安排 本次研究时间为6个月。 第1-2个月:表达载体的构建和毕赤酵母的转化; 第3-4个月:抗栓形成融合蛋白的表达和纯化; 第5-6个月:抗栓形成融合蛋白的定量和活性测定。 七、预期结果 通过本次研究,我们将成功构建毕赤酵母表达抗栓形成的融合蛋白的技术路线,并得到高效表达的毕赤酵母克隆。对得到的蛋白质进行定量和活性测定,可以评估毕赤酵母表达技术在抗栓形成融合蛋白生产中的应用潜力。 八、参考文献 1.TongL,ThakurA,GambhirA,etal.Novelapproachtoengineerantibodyfusionsforcancerimmunotherapy.Methods.2020.doi:10.1016/j.ymeth.2020.05.002. 2.ZhuY,ChouC,ChenY,etal.DevelopmentandcharacterizationofabioactivehybridBMP-2peptideforboneregeneration[J].ScientificReports,2018.8(1):10431. 3.XuY,WangX,HongY,etal.Developmentofahigh-throughputscreeningassayforinhibitorsofSARS-CoV-2helicase.ActaPharmaceuticaSinicaB,2021.11(1):288-296. 4.LiC,GuoH,XuY,etal.Productionofrecombinantporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirusantigensintobaccoplants[J].PlantCellReports,2007.26(12):1949-1957.