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朱鹮基因组BAC文库及MHC基因组精细物理图谱的构建的任务书 任务书 项目名称:朱鹮基因组BAC文库及MHC基因组精细物理图谱的构建 项目背景 朱鹮(Rhinopastyxp.sinensis)是世界上最濒临灭绝的大型鸟类之一,仅分布于中国境内。为了保护朱鹮这一珍稀物种,需要了解其基因组结构和MHC基因组信息。因此,本项目旨在构建朱鹮基因组BAC文库和MHC基因组精细物理图谱。 项目目标 1.构建朱鹮基因组BAC文库:收集朱鹮细胞样本,制备高质量的BAC文库; 2.构建MHC基因组的精细物理图谱:以BAC文库为基础,利用双色荧光原位杂交技术和高通量测序技术,确定MHC基因群的位置和分布。 3.基于朱鹮基因组BAC文库和MHC基因组精细物理图谱,分析朱鹮基因组结构和MHC基因组信息。 任务分解 任务1:采集朱鹮样本并制备高质量BAC文库 1.1采集朱鹮样本:选择适宜时间和地点,采集朱鹮的细胞样本(如血液、肌肉、皮肤等)。 1.2制备高质量BAC文库:应用标准的BAC文库构建技术,制备高质量的朱鹮基因组BAC文库。文库理论覆盖率至少达到6倍,BAC插入片段大小分布均匀,平均大小在100kb以上。 任务2:构建MHC基因组精细物理图谱 2.1确定MHC基因群:利用朱鹮基因组BAC文库中的MHC基因为引物进行PCR扩增,构建MHC基因组的初步框架图谱。 2.2双色荧光原位杂交技术:将MHC基因组的引物标记上荧光染料,并进行双色荧光原位杂交技术,确定MHC基因群的精细物理位置。 2.3高通量测序技术:利用高通量测序技术,对MHC基因群进行深度测序,确定基因序列和基因注释信息。 任务3:分析朱鹮基因组结构和MHC基因组信息 3.1基因组结构分析:利用朱鹮基因组BAC文库和MHC基因组精细物理图谱,对朱鹮基因组的结构特点、基因家族、基因分布和基因密度进行分析。 3.2MHC基因组信息分析:对MHC基因组进行注释和比对,分析MHC基因群的多样性、保守性和进化特点。 项目成果 1.制备高质量的朱鹮基因组BAC文库,为后续研究提供基础支持; 2.精细构建朱鹮MHC基因组物理图谱,揭示其基因组结构特点,为研究朱鹮免疫基因组提供重要参考; 3.分析朱鹮基因组结构和MHC基因组信息,拓展对珍稀物种保护和演化研究的认识。 参考文献: 1.董元.动物分子免疫学:分子生物学视角[J].生命的化学,2015,35(6):630-633. 2.XuH,HeW,JiangXL,etal.IsolationofaBACclonecontainingmajorhistocompatibilitycomplexclassIIBgenesanditsmappinginbamboopartridge(Bambusicolathoracica)[J].Molecularbiologyreports,2013,40(9):5551-5557. 3.揭瑞斌.双色荧光原位杂交技术在基因组研究中的应用[J].黑龙江畜牧兽医,2007,(22):4-6. 4.LiQ,LuL,XuX,etal.Ahigh-qualityAlpinemuskdeergenomeassemblyrevealsthemolecularbasisofmuskproductionandadaptiveevolution[J].NatureCommunications,2020,11(1):1-13.