TGEV强弱毒株的反向遗传系统及报告病毒的构建的任务书.docx

TGEV强弱毒株的反向遗传系统及报告病毒的构建的任务书
任务书
一、任务背景
传染病是具有高度传染性和致死性的疾病，对人类和动物健康构成威胁。病毒学是研究病毒结构、生命周期、病原性等方面的学科。在病毒学领域，研究病毒基因组对病毒致病性的影响，构建反向遗传系统和报告病毒等技术是当前热门的研究方向之一。
TGEV（Transmissiblegastroenteritisvirus）是一种重要的猪病毒，在世界范围内广泛分布。该病毒能引起猪的消化道严重损伤，严重情况下会导致猪的死亡。因此，研究TGEV的基因组和致病机制对保护猪的健康具有重要意义。
目前，利用反向遗传系统和报告病毒技术，可以研究TGEV致病机制，探索病毒基因组对病毒致病性的影响。因此，本任务旨在构建TGEV强弱毒株的反向遗传系统及报告病毒，以期实现对病毒致病机制的深入研究和保护猪的健康。
二、任务内容
1.构建TGEV的反向遗传系统
（1）根据TGEV的基因组序列选取合适的克隆载体，并将TGEV的基因组克隆到载体中。
（2）利用CRISPR/Cas9技术，对TGEV基因组中的重要基因进行基因敲除，以获得TGEV的反向遗传系统。
（3）通过反向遗传系统，构建TGEV的强毒、弱毒株，并进行基因组分析。
2.构建TGEV报告病毒
（1）以TGEV弱毒株为基础，在其基因组中插入荧光蛋白的表达基因，构建TGEV报告病毒。
（2）利用TGEV报告病毒，研究病毒的感染和复制路径、病毒基因组的传递和表达、病原性的变化等方面的问题。
3.实验设计和数据分析
（1）根据实验内容设计实验方案，完成实验操作。
（2）收集、整理实验数据，并进行统计分析。
（3）根据实验数据，撰写实验报告，形成科学论文。
三、任务目标
本任务旨在构建TGEV强弱毒株的反向遗传系统及报告病毒，实现对病毒致病机制的深入研究和保护猪的健康。具体目标如下：
1.成功构建TGEV的反向遗传系统，实现对病毒基因组的精准操作。
2.基于TGEV反向遗传系统，构建强毒、弱毒株，分析病毒基因组对病毒致病性的影响。
3.成功构建TGEV报告病毒，用于病毒感染的研究，探究病毒的感染和复制路径、病毒基因组的传递和表达、病原性的变化等方面的问题。
4.规范实验操作、准确记录实验数据，并撰写实验报告和科学论文，形成系统的实验报告和研究成果。
四、预期成果
1.成功构建TGEV的反向遗传系统，构建强毒、弱毒株，并通过基因组分析，探究病毒基因组对病毒致病性的影响。
2.成功构建TGEV报告病毒，用于病毒感染的研究，探究病毒的感染和复制路径、病毒基因组的传递和表达、病原性的变化等方面的问题。
3.撰写系统的实验报告和科学论文，发布于病毒学领域核心期刊。
五、参考文献
1.林默香,周华静,付桂烨.病毒反向遗传系统在基因功能研究中的应用[J].实验动物科学,2020,37(11):110-114+118.
2.王灿,李钊,黄卫东.病毒构建与研究中常用报告基因研究进展[J].动物检疫,2019,35(16):37-39,74.
3.ChenJ,LiuS,JiH,etal.Constructionofrecombinantpseudorabiesvirusexpressingenhancedgreenfluorescentproteinanditsapplicationinfluorescencequantitativedetection[J].MolecularBiologyReports,2009,36(3):373-378.
4.LiangH,WeiZ,JieW,etal.ExpressionofarecombinantporcinetransmissiblegastroenteritisvirusspikeproteininCHO-K1cellsanditsimmunogenicityinpigs[J].VirusResearch,2018,252:26-32.