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β—乳球蛋白源ACE抑制活性肽的研究的任务书 任务书 一、研究背景和意义 ACE体内存在于肺和血管内皮细胞表面,是一种重要的酶类分子。它可以将血管紧张素Ⅰ(AngiotensinI,AngⅠ)转化为血管紧张素Ⅱ(AngiotensinII,AngⅡ),使血管收缩和血压升高,同时它还能够将肺素转化为肺素Ⅰ。因此,ACE不仅是单一讲述的例子,它还扮演着重要的肾脏调节和心血管系统的。 另外,ACE的抑制还可以提高体内ACE抑制活性肽(ACEIAP)的浓度,如Bradykinin和Lys-Bradykinin等,这与降低血压有关。ACE抑制剂是治疗高血压和心力衰竭的常用药物。在流感病毒中,ACE抑制剂应用于控制病毒侵入,肺水肿和呼吸系统病变等并发症。 目前,ACE抑制剂的合成和制备技术已经取得了十分显著的进展。但是,直接获取高纯度的ACE抑制剂比较困难,所以研究ACEIAP具有更广泛的应用前景。β—乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-LG)是乳制品中含量最高的一种蛋白质,具有许多生物活性,如ACE抑制、抗氧化和抗菌等。 因此,本课题的目的是探究β-LG作为ACE抑制剂的潜力,并比较其与市售ACE抑制剂的抑制效果和稳定性,为开发新型ACE抑制剂提供理论依据和合理的设计思路。 二、研究内容和方法 (一)研究内容 1.提取β-LG 通过物理和化学方法提取混合多肽中的β-LG,并通过SDS-PAGE电泳和Westernblot分析其纯度和特异性。 2.β-LG的抑制效果 使用比色法(Hippuryl-His-Leu)对β-LG的ACE抑制效果进行评估,比较其与市售ACE抑制剂的效果,并进行半数效应浓度(IC50)计算。 3.β-LG的稳定性 通过温度、pH和酶解等各种条件下,对β-LG的稳定性进行分析,评测其用于药物制剂的可行性。 (二)研究方法 1.β-LG的提取 将牛乳放入筛网中进行初步筛选,去除其中的杂质和异物。然后将其进行离心分离,从而可分离出乳清液。接下来,通过酸、碱或酶等方法分离β-LG。 2.β-LG的抑制效果 首先,制备ACE酶的水溶液。将已制备好的ACE酶水溶液加到标准盘底部的孔中,然后加入待测样品和缓冲液,同时标记每一个孔颜色。然后,在37℃下加卡硫平显色剂,最后读取数据。 3.β-LG的稳定性 测量β-LG在不同温度和pH条件下的ACE抑制效应,并进行IC50计算;测量β-LG在酶解作用下的稳定性,并进行半衰期的计算。 三、研究计划 任务进度计划表: |任务内容|开始时间|结束时间| |--------|--------|--------| |β-LG提取和纯化|第1个月|第2个月| |SDS-PAGE电泳和Westernblot分析β-LG|第2个月|第3个月| |测定β-LG及市售抑制剂的ACE抑制效应并计算IC50值|第3个月|第4个月| |测定β-LG在不同温度和pH下的稳定性|第4个月|第5个月| |测定β-LG在酶解作用下的稳定性并计算半衰期|第5个月|第6个月| |数据分析和论文撰写|第6个月|第7个月| 四、预期成果和意义 本课题通过检测β-LG的抑制效果和稳定性,为开发和设计新型ACE抑制剂提供了可靠和合理的设计依据。同时,本课题在提取和纯化β-LG等方面也具有一定的创新性和实用性。该研究成果的实际应用可以用于新型ACE抑制剂的研发,并且可以为相关乳制品的开发提供参考和依据。