细胞破碎汇编.pptx

会计学生物分离过程的一般流程不同类型的细胞分泌目标产物的类型：第三章细胞破碎细胞破碎（cellrupture）技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁，使细胞内物质包括目的产物成分释放出来的技术。

为了研究细胞破碎，提高其破碎率，有必要了解细胞壁的组成和结构。3.1细胞壁的组成与结构3.1细胞壁的组成与结构3.2细胞破碎技术的分类/机械破碎影响破碎难易程度的重要因素：3.3常用破碎技术/3.3.1珠磨法操作条件的选择：破碎率的控制：3.3.2高压匀浆法(High-pressurehomogenization)——大规模细胞破碎的常用方法破碎的动力学方程：破碎压力的选择：破碎一般规律：（1）酵母较细菌难破碎；（2）处于静止状态的细胞较处于快速生长状态的细胞难破碎；（3）在复合培养基上培养的细胞比在简单合成培养基上培养的细胞较难破碎。3.3.3超声破碎（Ultrasonication）——主要用于实验室超声破碎的适用性：3.3.4酶溶法——研究较广的一种方法酶溶法的特点（外加酶）：3.3.5化学渗透法作用原理：（3）有机溶剂：能分解细胞壁中的类脂。
（4）变性剂：如盐酸胍(GuanidinHCl)和脲（Urea）与水中氢键作用，削弱溶质分子间的疏水作用，从而使疏水性化合物溶于水溶液。

☀各种试剂的不同作用机理，将几种试剂合理地搭配使用能有效地提高胞内物质的释放率。
例：单独用0.1mol/L盐酸胍处理E.coli仅释放约1%的蛋白质
0.5%TritonX-100处理蛋白质释放率为4%
二者合用，蛋白质释放率可达53%左右化学渗透法的优点：化学渗透法的缺点：3.3.6选择破碎方法的依据3.4破碎率的测定3.5破碎技术的发展方向机械法与非机械法：例：面包酵母细胞的破碎

用溶解酶（Zymolyase）预处理，然后在95MPa压力下高压匀浆4次，总破碎率接近100%。
而单独用95MPa压力高压匀浆4次，破碎率只有32%。3.5.2与上游相结合3.5.2与上游相结合3.5.3与下游相结合

谢谢大家！