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Interleukin23基因在毕赤酵母中的诱导表达的综述报告 引言 毕赤酵母(Pichiapastoris)是一种常用的真菌,被广泛用于重要的生物技术应用,例如外泌表达蛋白和制药产品的生产。为了实现高效的蛋白生产,必须了解对毕赤酵母刺激作用的信号途径,包括对interleukin23(IL-23)基因的诱导表达。IL-23是由p19和p40两个亚基组成的蛋白质,它是一种重要的cytokine,与许多重要的免疫反应有关。在这篇论文中,我们将综述毕赤酵母中IL-23基因的诱导表达,以及如何控制这个过程以更有效地生产这种蛋白。 IL-23的生物学功能 IL-23是一种细胞因子,其生物学功能主要与其类型;IL-23是由一组类似IL-12的α和β亚单位组成,这些亚单位是II型细胞浆球蛋白受体的成员。受体通过调节多种细胞类型的株式抑制作用,对启动和调节多种细胞株式的免疫反应具有很大的影响,包括由TH1/TH17细胞所调节的自身免疫反应。 IL-23的诱导表达在V.pastoris中 毕赤酵母是一种常用的生物技术工具,因为它能够以高效的方式表达外泌蛋白。IL-23是一种有趣的分子,因为它可能有助于治疗自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎和银屑病。因此,在毕赤酵母中通过诱导表达IL-23是一个很有前途的方向。 IL-23的诱导表达可以通过加入多种诱导剂来实现。在一个最近的实验中,表达了由pPICZalpha()载体编码(IL-23p19)和IL-23p40的基因。使用的诱导剂包括methanol和peptone。 结果显示,加入peptone可以导致以p19为目标的表达最高在45小时后,但如果继续添加peptone,将会导致表达衰减。通过比较表达了p19的基因和表达同时含有p19和p40基因的细胞系,表明同时表达了p19和p40的基因可以增加胞外IL-23的产量,并且协助复杂编码的中锂组成增加细胞存活。这些结果表明,在毕赤酵母中进行IL-23的诱导表达可能会带来更好的生产结果。 控制IL-23的诱导表达 当涉及到对IL-23的诱导表达时,需要考虑一些重要的变量来控制这个过程以最大效益地生产这个蛋白。需要考虑的因素包括: 1.在细胞培养期间添加的诱导剂类型和剂量。在上述实验中,添加peptone和methanol都可以实现IL-23的诱导表达,但是过多的添加可能会导致细胞死亡和表达降低。 2.选择合适的载体系统。在许多操作中,使用的载体可以对表达的效率产生显著影响。在进行IL-23的表达时,载体的选择和设计都会影响表达结果。 3.维持合适的细胞密度。在任何生物过程中,合适的细胞密度都是至关重要的,对于IL-23的诱导表达也不例外。如果细胞过度密集,可以导致表达效率降低,而如果细胞数量过少,则会降低产量。 结论 总之,通过对毕赤酵母中IL-23基因的诱导表达,我们可以有效地生产这种有前途的生物活性蛋白。虽然这个过程涉及许多变量和控制因素,但是各种不同的诱导方案已经提出,以提高诱导表达效率。未来的研究应该集中于研究所有参与因素之间的交互作用,以解决任何问题并继续推动这个领域的发展。