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利用cDNA-SRAP技术分析玉米耐低磷基因的差异表达的中期报告 本中期报告旨在介绍利用cDNA-SRAP技术分析玉米耐低磷基因差异表达的实验设计、进展和结果。 实验设计: 1.材料选择:选取2个具有明显低磷敏感和耐低磷性差异的玉米品种,分别命名为A和B。 2.RNA提取:从A和B两个品种的幼苗中分别提取总RNA样品。 3.cDNA合成:利用逆转录酶将RNA转录成cDNA,形成cDNA库。 4.SRAP扩增:设计SRAP引物,进行PCR扩增,选择差异明显的条带。 5.克隆测序:将不同的PCR产物克隆到质粒载体上,进行Sanger测序。 6.生物信息学分析:利用序列比对、功能注释等方法进行分析。 实验进展: 1.RNA提取:成功提取A和B两个品种的总RNA,并进行质量检测。 2.cDNA合成:逆转录反应成功进行,cDNA浓度和质量良好。 3.SRAP扩增:利用设计好的引物进行PCR扩增,扩增产物可见,发现不同品种间的差异。 4.SRAP扩增产物检测:通过电泳,筛选出不同品种间差异明显的条带,并进行单个条带克隆。 5.克隆测序:PCR产物的克隆测序结果表明,某些基因表达在不同品种中存在差异。 6.生物信息学分析:对克隆测序所得数据进行比对和功能注释。 实验结果: 1.经过比对和注释,鉴定出一批与低磷相关的基因。 2.某些基因的表达受到低磷响应,显示出不同品种间的差异。 3.进一步挖掘得到一些潜在的关键基因,这些基因可能参与到玉米耐低磷的机制中。 本中期报告说明了利用cDNA-SRAP技术分析玉米耐低磷基因差异表达的实验设计、实验进展和结果,从中可以看出该技术对研究玉米抗逆性能具有重要的作用。