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第40卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第2期 2012年2月ChineseJournalofAnalyticalChemistry292~297 DOI:10.3724/SP.J.1096.2012.10288 高效液相色谱法同时测定食品中7种非食用色素 范文锐吴青*劳扬卢玉珊 (华南农业大学食品学院,广东省食品质量安全重点实验室,广州510642) 摘要建立了高效液相色谱法同时测定食品中7种非食用色素(碱性嫩黄O、碱性橙、酸性橙Ⅱ、酸性金黄、玫 瑰红B、对位红、苏丹红Ⅰ)的方法。依次采用乙腈、甲醇和碱性甲醇提取豆制品和肉制品;采用乙腈和70%乙腈 依次提取调味品采用TM色谱柱(,),以甲醇乙酸铵水溶液( 。SunFireC18250mm×4.6mm5μm-50mmol/LH3PO4 调至pH4.5)为流动相,梯度洗脱,流速1mL/min,测定波长为450和520nm。7种非食用色素的在各自相应浓 度范围内线性相关系数均大于0.998;检出限(LOD)在0.01~0.1mg/L之间;定量限(LOQ)在0.18~ 1.2mg/kg之间。平均回收率均大于80%;相对标准偏差(RSD,n=3)在2.0%~5.7%之间。 关键词高效液相色谱;非食用色素;碱性嫩黄O;碱性橙;酸性橙Ⅱ;酸性金黄;玫瑰红B;对位红;苏丹 红Ⅰ 1引言 为降低成本、赋予食品诱人的外观、稳定色泽,某些生产商在食品生产过程中违法使用非食用色素, [] 如在辣椒粉或辣椒酱中使用苏丹红Ⅰ、对位红、玫瑰红B1~3;在豆干、腐竹、腐皮中使用碱性橙、碱性嫩 黄和酸性金黄[4,5];在卤制熟食和软包装肉制品中使用酸性橙[6];在茶叶中添加美术绿等。为此,卫生 部于2008年印发了“食品中可能违法添加的非食用物质名单(第一批)”通知,列出了7种非食用色素, 可见加强对食品中非食用色素的检测十分必要。 在被非法使用的非食用色素中,以呈现红色、黄色和橙色的非食用色素种类最多,同时使用的也最 为普遍。如在“食品中可能违法添加的非食用物质名单(第一批)”中就列出了6种此类色素(苏丹红 Ⅰ、碱性橙、玫瑰红B、碱性嫩黄O、酸性橙、用于熟肉制品的工业染料),由于生产者隐瞒掺杂非食用色 素,因而对非食用色素的分析因无法得知其化学名称而成为检测的难题。因此,有必要建立一种同时检 测多种非食用色素的方法,以提高分析检测的效率。现有报道多为一种或同一类非食用色素的检测方 法,本研究选取了目前已发现用于食品中的7种非食用色素为目标检测物,建立了同时测定的高效液相 色谱方法,本方法分析快速准确。 2实验部分 2.1仪器、试剂与样品 高效液相色谱系统(美国公司),配泵和紫外检测器;TM WatersWaters1525Waters2487SunFireC18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm,美国Waters公司);KQ-100DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器 有限公司);Milli-Q超纯水器(美国Millipore公司);WR-2001溶剂过滤器(上海嘉鹏科技有限公司); UV-3010紫外可见分光光度计(日本日立公司)。 碱性嫩黄O(97.0%)、碱性橙(99.0%)、酸性橙Ⅱ(≥98.0%)、酸性金黄(≥98.0%)、玫瑰红B ()对位红()苏丹红()标准品均购于公司乙酸铵氨水无水 97.0%、99.0%、Ⅰ97.0%Sigma。、、Na2SO4 为分析纯,甲醇和乙腈为色谱纯。碱性甲醇:取10mL氨水与490mL甲醇混合。50mmol/L乙酸铵溶 液:准确称取乙酸铵,用超纯水溶解,定容至,再用调至 1.925g500mLH3PO4pH4.5。 样品为市售包装腐竹,豆干,真空包装熟鸡爪,包装黄鱼,辣椒酱和豆瓣酱。 2011-03-28收稿;2011-10-11接受 本文系广东省大学生创新实验资助项目(No.1056410025) *E-mail:wuqing@scau.edu.cn 第2期范文锐等:高效液相色谱法同时测定食品中7种非食用色素293 2.2色谱条件表1梯度洗脱程序 Table1Programofgradientelution SunFireTMC色谱柱(250mm×4.6mm, 18甲醇乙酸铵缓冲液 时间50mmol/L曲线类型 );流动相:甲醇乙酸铵溶液Methanol50mmol/LAmmoniumacetate 5μm-50mmol/LTime(min)Curvetype (%)(pH=4.5)(%) (),梯度洗脱程序见表;流速: pH4.5102575- 1mL/min;柱温:35℃;检测波长:碱性嫩黄23565线性Linear 线性 O、碱性橙、酸性橙Ⅱ、酸性金黄、对位红和54753Linear 66535线性Linear 苏丹