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红花黄素体外诱导BMSCs分化为神经元样细胞的实验研究的中期报告
引言：
红花黄素（crocin）是一种天然的色素，主要存在于红花珠中。它具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性。过去的研究表明红花黄素对神经系统具有重要的保护作用。最近的研究表明，红花黄素对骨髓间充质干细胞（BMSCs）的增殖和分化也有一定影响。本研究旨在探究红花黄素对人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）分化为神经元的影响。
实验方法：
1.细胞培养
hBMSCs用DMEM/F12培养基+10%FBS培养14天，并于80%培养密度时进行分化实验。
2.实验组设置
实验组分别为：对照组（添加相同量的生理盐水）、低剂量组（0.05mg/L红花黄素）、中剂量组（0.1mg/L红花黄素）、高剂量组（0.2mg/L红花黄素）。
3.神经元诱导
收集hBMSCs，使用神经干细胞培养基将其转移至96孔板中。对于对照组，加入相同量的生理盐水。对于实验组，分别添加低、中、高剂量的红花黄素。每个组共进行3次重复实验。细胞分化48小时后，利用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和免疫荧光方法检测细胞内神经元标记物的表达，包括βIII-tubulin、NeuroD和MAP2。
结果：
1.在不同的红花黄素剂量下分化hBMSCs
结果显示，添加红花黄素可以促进细胞的神经元分化。在中剂量（0.1mg/L）和高剂量（0.2mg/L）组中，细胞形态明显改变，呈现出了神经元的形态。
2.红花黄素诱导下神经元特异性标记物的表达
在红花黄素诱导下，细胞内βIII-tubulin、NeuroD和MAP2的表达都得到了显著提高。而且这个变化是剂量依赖性的。尤其是在高剂量组，细胞内βIII-tubulin、NeuroD和MAP2的表达分别达到了对照组的5.7倍、4.8倍和3.9倍。
讨论：
本实验结果表明，红花黄素可以诱导hBMSCs分化为神经元样细胞，表现出了神经元的形态特征。而且这个过程是剂量依赖性的。这些结果表明红花黄素可能是一种可行的促进hBMSCs神经元诱导的药物。值得进一步的研究。