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体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为T淋巴细胞样细胞的中期报告 1.研究背景: 干细胞具有自我复制和分化为不同种类细胞的能力,因此在组织工程、再生医学和疾病治疗等领域具有广泛的应用前景。小鼠胚胎干细胞(mESCs)作为最早被发现的一种干细胞,一直受到广泛关注。体外诱导mESCs分化为T淋巴细胞样细胞具有重要的意义,可以深入了解T淋巴细胞分化和功能调控的分子机制,同时也有助于治疗T细胞相关疾病。 2.实验方法: 本实验采用EB(EmbryoidBody)诱导和OP9-DL1(OP9cellsstablytransfectedwiththeNotchligandDelta-like1)共培养两种方法诱导mESCs分化为T淋巴细胞样细胞。在EB诱导培养中,mESCs首先转变为三个胚层细胞的前体,并最终分化为T淋巴细胞。在OP9-DL1共培养中,OP9-DL1细胞主要通过Notch信号通路诱导mESCs分化为T细胞样细胞。 3.实验结果: 经过不同培养时间的EB诱导和OP9-DL1共培养,我们观察到了T淋巴细胞样细胞的形成。首先,我们使用流式细胞术检测mESCs分化为T淋巴细胞的表面标记物,包括CD4、CD8、CD25和CD44等。结果显示,经过EB诱导和OP9-DL1共培养,mESCs成功分化为表达CD4和CD8的双阳性T细胞及其Coreceptor(CD3)的丰富细胞群,同时表达TCR的丰富细胞数也逐渐增加。 4.结论: 通过EB诱导和OP9-DL1共培养两种方法,我们成功地将mESCs分化为T淋巴细胞样细胞,并成功检测到CD4、CD8、CD25和CD44等表面标记物。这为进一步研究T淋巴细胞的分化与功能调控提供了基础。