课题1 微生物的实验室培养.ppt

课题1微生物的实验室培养微生物包括哪五类：细菌的外形与大小细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，细胞质中又有液泡、储存性颗粒、核质等。*细胞壁芽孢菌落：菌落放线菌链霉素、土霉素、四环素、
氯霉素、红霉素、庆大霉素病毒的结构病毒SARS病毒、禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）2、病毒的增殖：真菌生殖细菌的营养类型了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、基础知识：2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)选择培养基根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。
合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低
缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。
优点：营养成分丰富，培养效果好
缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;血清中含有：
①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）
②多种金属离子；
③激素；
④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。
⑤各种生长因子
⑥转移蛋白
⑦不明成分液体培养基：固体培养基：菌落，菌苔半固体培养基：4.培养基的用途（二）无菌技术（１）消毒定义：
利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒（High-levelDisinfection）、中程度消毒（Intermediate-levelDisinfection）、低程度消毒（Low-levelDisinfection）三种方式。（2）灭菌的定义：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min
2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min
3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源
4、紫外线消毒
……1、灼烧灭菌

2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。

3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。
而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。分类3.微生物实验室培养的基本操作程序1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？三、实验操作1.计算2.称量3.溶化
4.灭菌:将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。
5.倒平板:待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种.
6．无菌检查：
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。倒平板技术1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？(二)纯化大肠杆菌问题讨论2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？2.稀释涂布平板法问题讨论微生物的恒温培养微生物的恒温培养四、课题成果评价菌种的保存本课题知识小结:练习:1.为1升水中大肠菌群不得超过3个，即大肠菌群指数不得大于3。某人在测定自来水中的大肠杆菌群时，先将5升自来水水样浓缩至5毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到4个培养皿中培养，4次培养后计数的菌落数分别是32、38、35、8。请回答下列问题：
(1)根据上述结果计算，被检水样大肠菌群指数为，水样(是、否)达标。
(2)下表是某公司研发的一种测定大肠菌群的配方(g／L)。
从成分看，该培养基的类型是培养基，可以推测培养基配方中的营养物质应包括碳源、氮源和。
(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和稀释平板涂布法，但无论哪种接种方法，其主要目的都是防止杂菌污染，请指出灭菌和消毒这两种方法的差异。
。(4)利用培养基技术不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。请简要说明这两项技术应用设计思路的相同点以及区别。
相同点：。

不同点：。
(5)现有一种珍稀兰花，请简述如何通过组织培养获得脱毒苗。
。2.（09辽宁、宁夏卷）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑__