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自然杀伤细胞分离纯化及体外扩增技术体系的研究的综述报告
自然杀伤细胞（naturalkillercell,NK细胞）是一类重要的免疫细胞，能够识别并杀伤感染病原体或恶性肿瘤细胞，同时又不需要特异性抗原的识别。因此，NK细胞在人类抗感染和抗肿瘤方面的应用具有广泛的潜力。然而，NK细胞的分离纯化和体外扩增技术仍然存在局限性和挑战性。本文将就此方面的研究进展进行综述。
一、NK细胞的来源
目前，常用的NK细胞来源有三种：人体外周血中的NK细胞、胎盘中的NK细胞和造血干细胞分化而来的NK细胞。
人体外周血NK细胞的含量非常少，占外周血单个核细胞的5%以下。然而，这些NK细胞的抗肿瘤能力非常强，对抑制癌症细胞的生长和扩散具有显著的作用。因此，目前研究主要集中在人体外周血NK细胞方面。
二、NK细胞的分离纯化
目前，NK细胞的分离纯化方法主要包括负电子选择法和磁珠分选法。
负电子选择法是将人体外周血单个核细胞分离后，除去免疫表型CD3阳性和CD56阳性的细胞，获得纯化的NK细胞。此方法操作简单，但存在漏选CD56阴性的NK细胞的缺陷。
磁珠分选法则通过使用贴有抗CD56抗体的磁珠，将CD56阳性的细胞分离出来。此方法操作简单、准确率高，但是需要使用昂贵的磁珠，成本高昂。
三、NK细胞的体外扩增
在目前的实验室研究中，体外扩增NK细胞的方法主要包括两种：采用外周血NK细胞经过单克隆抗体培养和采用NK细胞的短期培养。
采用单克隆抗体培养的方法，需要使用IL-2诱导NK细胞活化和增殖。但是，这种方法存在NK细胞易向其他免疫细胞分化的缺陷。同时，长期重复培养对细胞的稳定性影响较大，扩增效果受到限制。
短期培养的方法，通过使用激活因子，如IL-2,IL-12,IL-15等，促进NK细胞的增殖。该方法消耗时间短，扩增效果好，且不易因重复培养而影响NK细胞的稳定性。
四、总结
目前，NK细胞越来越成为抗癌治疗方面的研究热点。虽然NK细胞的分离纯化和体外扩增技术尚存在一些局限性，但随着技术的发展和突破，这些局限性将被逐渐解决。未来，NK细胞在肿瘤治疗中的潜力将被进一步挖掘。