菠萝蛋白酶的提取和活力测定.ppt

项目一一、实验目的1、掌握从原料物中提取分离目的蛋白酶；2、掌握对目的蛋白酶质量的检验；3、学习酶比活力的计算；三、实验材料和试剂1、实验材料新鲜菠萝(0.735kg)、0.1mg/ml牛血清蛋白四、实验器材和仪器五、实验操作方法法和步骤（二）考马斯亮蓝法测定酶制品中蛋白酶含量根据上表，以吸光度为纵坐标，标准蛋白质量为横坐标作图（三）菠萝蛋白酶活力的测定6、按步骤5混匀，在37℃水浴下反应10min;7、向10支试管中各加入8ml1mol/L的氢氧化钠溶液，摇匀，于室温放置30min;8、取各自对应的试管在275nm波长下测定吸光度9、测定结果如下（四）数据的处理5、在活力的测定步骤中，设置了几个梯度，最后的结果中应该有至少两支试管中的溶液的吸光度的值相同，但本组实验没有得到这种结果。6、活力测定中，由于操作不当，导致部分沉淀溶解在了上清液中，溶液微浑浊，对吸光度的测定有影响。Theend取新鲜干净的菠萝皮、刺、芯等出汁率达45%以上的下脚料，压榨，取汁滤除果屑。滤液添加0.025-0.05%的苯甲酸，加5%高岭土进行吸附。将高岭土吸附物用饱和碳酸钠溶液调pH6.7-7.0后，加5%氯化钠，搅拌后压滤。取滤液用盐酸调pH4.8-5.1，加硫酸铵，静置沉淀，取沉淀减压干燥，即为菠萝蛋白酶。对菠萝下脚料计，收率0.054-0.103%。
生产方法由菠萝(Ananascomoslgs和A.bracteatus)果实及茎(主要利用其外皮)经压榨提取、盐析(或丙酮、乙醇沉淀)再分离、干燥而得。