出芽短梗霉产色素能力弱化菌株的筛选.pdf

第22卷第1期无锡轻工大学学报V01．22No．1
2003年1月JournalofWuxiUniversityofLightIndustryJan．2003

文章编号：1009—038X{2003)01—0016—05

出芽短梗霉产色素能力弱化菌株的筛选

朱一晖，张丽敏，詹晓北
(江南大学iT_-业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214036)

摘要：出芽短梗霉在发酵过程中会产生一种与黑色素相似的黑色物质，并且这种物质会牢固地
粘附在短梗霉多糖上．对出芽短梗霉Au06口slzmpullul口B一1菌株进行60Co诱变，获得了一株
产色素能力缺失型菌株Co3。其菌落和发酵液颜色为白色或淡绿色．红外光谱和磁核共振图谱表明
该菌株的产物与标准短梗霉多糖样品有相同的结构．
关键词：出芽短梗霉；短梗霉多糖；60Co诱变；产色素能力弱化菌株
中图分类号：Q815文献标识码：A

IsolationofAureobasidiumpullulans60CoMutagensisStrains

thatProducePullulanwithReducedPigmentation

ZHUYi—hui。ZHANGIi-min，ZHANXiao-bei
、
(KeyLaboratoryofIndustrialBiotechnology，MinistryofEducation．SouthernYangtzeUniversity，Wuxi214036，China)

Abstract：Aureobasidiumpullulansreleasesamelanin—likeblackpigmentduringthecultivationand
thepigmentwastightlyadheredtOthepullulan．Thefeasibilityof叫Comutagenesisforpigment·free

pullulanproductionwasstudiedonA“r∞6口s“mpullulansB一1strain．Apigment—freemutant
(Co3)wasobtained．ThecolonyandbrothofstrainCo3arewhiteorlightgreen．Analysisofinfrared
spectraandC—NMRspectrumconfirmedthattheproductwasidenticalwiththestandardpullulan

sample．
Keywords：Aureobasidiumpullulans；pullulan；叫Comutagenesis；pigment—freemutant

多糖是一类高分子化合物，在食品，化学及医pullulans)合成的微生物多糖．它是一种天然的水
药工业有着广泛的应用．传统的天然多糖和化学合溶性中性葡聚糖，无色，无味，无毒，具有良好的耐
成高分子化合物都有其局限性．微生物多糖生产周热性、耐盐性及耐酸碱性，可广泛应用于食品、化妆
期远低于植物和海藻多糖，而且产量、产品质量和品、涂料、光敏树脂、肥料、铸造、烟草以及制药等工
价格受季节和气候影响不大。并且可以安全地应用业[1I．
于食品、医药、化妆品等行业。可以被微生物降解．在发酵过程中，出芽短梗霉会分泌出与黑色素
近年来微生物多糖研究得到了迅猛发展，其中有些相似的黑色或墨绿色物质，这种物质会牢固地粘附
已具备了工业应用价值并已工业化⋯．在短梗霉多糖上，很难用一般方法除去，限制了短
短梗霉多糖是由出芽短梗霉(Aureobasidium梗霉多糖的应用．3J．这种黑色素可以通过Sevag

收稿日期：2002—06—27；修回日期：2002—10—16．
基金项目：江苏省国际合作项目资助课题(BS99719)．
作者简介：朱一晖(1976一)，男，福建漳州人，工学硕士，助教

第1期朱一晖等：出芽短梗霉产色素能力弱化菌株的筛选17

分馏法【4J去除，但是要完全去除黑色素，必须重复落，转接到斜面．摇瓶培养，观察发酵液颜色．测定
多次Sevag分馏法，而每一次除色素会损失大约多糖含量．
15％的多糖，所以最终不含色素的短梗霉多糖得率1．2．4短梗霉多糖结构鉴定方法
很低．此方法仅适合于少量多糖的提取，应用在大1)短梗霉多糖纯化：发酵液在7000r／min离
量产品的提取上是不实际的．作者采用0Co诱变育心30min，倾出上清液．上清液中加入两倍体积的
种方法，以期获得产色素能力缺失突变株．无水乙醇，4℃放置12h．在7000r／min离心20
rain，倾去上清液，将沉淀的粗多糖用丙酮和乙醚反
1材料与方法复冲洗，再溶于蒸馏水中．溶液置于截流相对分子
质量为12000～1