化妆品中10种α-羟基酸的检测方法.doc

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化妆品中10种α-羟基酸的检测方法
Determinationof10α-hydroxyacidincosmetics

1范围
本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中α-羟基酸的含量。
本方法适用于水剂、膏霜乳液化妆品中α-羟基酸含量的测定。
本方法所指的α-羟基酸包括葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、扁桃酸、二苯乙醇酸和羟基辛酸。
2方法提要
以水提取化妆品中葡糖醛酸等10种α-羟基酸组分，用高效液相色谱仪进行分析，以保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。
本方法中10种α-羟基酸的检出限、定量下限及取样量为1g时检出浓度和最低定量浓度见表1。

表110种α-羟基酸的检出限、定量下限和检出浓度、最低定量浓度
α-羟基酸
组分检出限
（μg）定量下限
（μg）检出浓度
（μg/g）最低定量浓度
（μg/g）葡糖醛酸0.080.24150450酒石酸0.030.0960180羟基乙酸0.020.0640120苹果酸0.020.0640120乳酸0.050.15100300柠檬酸0.020.06401202-羟基丁酸0.040.1280240扁桃酸0.0010.00326二苯乙醇酸0.0010.00313羟基辛酸0.020.06401203试剂和材料
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。
3.1磷酸氢二铵，分析纯。
3.2磷酸，优级纯。
3.3甲醇，色谱纯。
3.4标准物质：10种α-羟基酸标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号列于表2。
3.5混合标准储备溶液：分别精密称取（精确到0.0001g）葡糖醛酸400mg、酒石酸200mg、羟基乙酸400mg、苹果酸400mg、乳酸500mg、柠檬酸400mg、2-羟基丁酸500mg、扁桃酸10mg、二苯乙醇酸10mg和羟基辛酸400mg于同一50mL容量瓶中，加水40mL，60℃超声15min使溶解，用水定容，配制成混合标准储备溶液。
表210种α-羟基酸中文名称、英文名称、CAS登录号、
分子式、相对分子质量
序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量1葡糖醛酸Glucuronicacid6556-12-3C6H10O7194.142酒石酸Tartaricacid87-69-4C4H6O6150.093羟基乙酸Glycolicacid79-14-1C2H4O376.054苹果酸Malicacid97-67-6C4H6O5134.095乳酸Lacticacid79-33-4C3H6O390.086柠檬酸Citricacid77-92-9C6H8O7192.1272-羟基丁酸钠DL-2-HydroxybutyricAcidSodium5094-24-6C4H7NaO3126.098扁桃酸Mandelicacid90-64-2C8H8O3152.159二苯乙醇酸Benzilicacid76-93-7C14H12O3228.2410羟基辛酸Hydroxycaprylicacid617-73-2C8H16O3160.214仪器和设备
4.1高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。
4.2天平。
4.3超声波清洗器。
4.4水浴锅。
4.5高速离心机。
4.6pH计。
4.7涡旋振荡器。
5分析步骤
5.1混合标准系列溶液的制备
分别精密移取不同体积的混合标准储备溶液（3.5）于10mL容量瓶中，用水定容，配制成浓度如表3所示的混合标准系列溶液。
表310种α-羟基酸的标准系列浓度
α-羟基酸
组分葡糖
醛酸酒石酸羟基
乙酸苹果酸乳酸柠檬酸2-羟基丁酸扁桃酸二苯乙醇酸羟基
辛酸混合标准系列溶液，mg/L100501001001251001252.52.5100200100200200250200250552004002004004005004005001010400800400800800100080010002020800200010002000200025002000250050502000400020004000400050004000500010010040005.2样品处理
称取样品1g（精确到0.0001g）于10mL具塞比色管中，置于90℃水浴中30min以去除挥发性有机溶剂，加水至10mL刻度，充分涡旋混合30s，60℃超声提取30min，取适量样品在10000rpm下高速离心15min，取上清液过0.45μm的滤膜后作为待测溶液。如样品为油包水等难于在水中分散剂型，可先加入1ml异丙醇涡旋混合30s使分散均匀，再加水至10mL刻度。
5.3参考色谱条件
色谱柱：C18柱（250mm×4.6mm×5μm），或等效色谱柱；当样品基质对待测α-羟基酸有干扰时，可采用C18柱（