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葡萄鲨烯合酶基因的克隆与原核表达的综述报告
葡萄鲨烯合酶是一种关键的酶，参与着动物体内胆固醇和类固醇的合成。本文将就葡萄鲨烯合酶基因克隆和原核表达的相关研究进行综述。
一、葡萄鲨烯合酶基因的克隆
葡萄鲨烯合酶基因是由多个exon和intron组成，在哺乳动物中与KDR和FLT1等基因紧密相连，被认为是一种高度保守的基因。因此，为研究葡萄鲨烯合酶基因的表达和功能，在过去几十年里，多个研究小组对该基因进行了克隆研究。
首先，早在1988年，Sugimoto等人在大鼠和兔子的肝脏中分离了葡萄鲨烯合酶基因，并通过克隆的方式进行了初步描述。此后的研究中，有关葡萄鲨烯合酶基因克隆的工作日渐增多，并覆盖了不同物种和组织类型。如在1997年，Zhao等人在人类肝细胞中克隆了葡萄鲨烯合酶基因，后来通过PCR技术对该基因进行了扩增和纯化。2005年，Cognet等人通过荧光原位杂交技术和全基因组扫描法，成功地从Zeigler鲤鱼中克隆了葡萄鲨烯合酶基因，并推断该基因在脂质代谢和免疫应答中具有重要作用。
综合来看，葡萄鲨烯合酶基因的克隆研究已经涵盖了多个物种和组织类型，为后续的研究提供了重要的参考数据。
二、葡萄鲨烯合酶基因的原核表达
为了进一步探究葡萄鲨烯合酶基因的功能和结构，许多研究小组对其进行了原核表达实验。原核表达是利用原核细胞内源性机制表达外源蛋白质的方法，因为其表达效率高、筛选操作简单、成本低廉，在蛋白质工程、功能研究等领域得到了广泛应用。
如在2013年，Maher等人通过将大鼠葡萄鲨烯合酶基因的cDNA插入到pET28a载体中，然后转化大肠杆菌进行表达，获得了大量的重组蛋白质。此外，Kang等人也成功地将小鼠葡萄鲨烯合酶基因克隆到pQE60载体中，在大肠杆菌中高效表达并纯化了该蛋白质。
不难看出，葡萄鲨烯合酶基因的原核表达已经成为研究该基因结构和功能的重要手段。
总结来看，葡萄鲨烯合酶基因的克隆和原核表达研究已经涉及多个物种和组织类型，并在后续研究中发挥了重要的作用。在今后的研究中，研究者们可以进一步深入探讨葡萄鲨烯合酶基因的调控机制及其与疾病的关联。