1种快速检测乳及乳制品中皮革水解蛋白的方法.pdf

—２６４—江苏农业科学２０１４年第４２卷第２期

许晔，宋亮．１种快速检测乳及乳制品中皮革水解蛋白的方法［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（２）：２６４－２６５．
１种快速检测乳及乳制品中皮革水解蛋白的方法

许晔１，宋亮２
（１．江苏教育学院生命科学与化学学院，江苏南京２１００１３；２．扬州大学化学化工学院，江苏扬州２２５００２）

摘要：在乳及乳制品中添加皮革水解蛋白对乳及乳制品的生产和消费产生很大负面影响，引起社会各方关注，为
保证乳及乳制品的质量安全，急需快速、简便的民用检测乳及乳制品中是否含有皮革水解蛋白。本研究建立了乳及乳
制品中皮革水解蛋白检测方法，该方法中样品无需进行前处理，２ｍＬ乳及乳制品中加入２ｍＬ硫酸，１００℃水浴
６．５ｍｉｎ进行显色反应。结果表明，该方法对乳及乳制品中皮革水解蛋白最低检测限为０．２５ｍｇ／ｍＬ，满足简便、快速
的定性分析要求。
关键词：乳；乳制品；皮革水解蛋白；快速检测
中图分类号：Ｒ１５５．５＋７文献标志码：Ａ文章编号：１００２－１３０２（２０１４）０２－０２６４－０２

蛋白质是乳及乳制品中的主要营养成分，但是一些不法
１材料与方法
企业为谋取暴利，在乳及乳制品中添加有机化工原料、不合法
的动植物蛋白等，以提高蛋白质含量。近年来，媒体频繁报道１．１材料
的“皮革奶”事件让乳品产业受到一次次重创［１］。掺假乳会皮革水解蛋白粉（蛋白质含量７８％），特仑苏纯牛奶（经
直接引起食品安全问题，影响奶农、生产厂家和消费者的利过ＧＢ／Ｔ９６９５．２３—２００８《肉与肉制品羟脯氨酸含量测
益［２－３］。在常规检测牛奶中蛋白含量时，结果是乳制品中总定》［９］的方法未测出水解蛋白，为合格乳，蛋白含量３１％）。
蛋白质含量，而不是乳制品中乳蛋白的实际含量［２－３］，而皮革以上材料的蛋白质含量均由凯氏定氮法［１５－１６］测得。
水解蛋白与三聚氰胺不同的是，它由皮革经过化学、生物技术正常牛奶每１００ｍＬ约含有蛋白质３．４ｇ、脂肪１．３ｇ（考
处理，水解出原有的蛋白（胶原蛋白），是真正的蛋白质。所虑到直接添加脂肪与水不容且脱脂奶中无脂肪，以下的模拟
以，皮革水解蛋白添加在乳及乳制品中更为隐蔽，检测难度皮革奶中未加入脂肪），碳水化合物（主要是乳糖）５．０ｇ，根据
更大。以上配比取０．４３ｇ的皮革水解蛋白（蛋白含量约为０．３４ｇ），
若是较为纯净的皮革水解蛋白被人服用后伤害不大，而加入１０ｍＬ蒸馏水，０．５ｇ的乳糖，混合均匀再与１５ｍＬ的合
不法商贩是将生产皮衣、皮沙发、皮包等皮革下角料进行化格乳样混匀（提高合格乳添加量可保证皮革水解蛋白充分溶
学、生物水解后制得的皮革水解产物添加到兑了水的牛奶中解）。最终制得的添加皮革水解蛋白粉的自制皮革奶２５ｍＬ。
以提高蛋白含量，而鞣质皮革下角废料中含有重金属铬用皮革水解蛋白制得的皮革奶自制样外观与正常牛奶一样，
（ＶＩ），含有铬离子的牛奶被人服用后，可造成人体重金属中乳白色，无异味，且经凯氏定氮操作测得蛋白含量与合格乳相
毒，导致关节疏松、关节肿大。近期国家卫生部已将皮革水解近（蛋白含量大于２．９５％为合格乳）。
蛋白公布为食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食１．２方法
品添加剂品种（第二批）［４－５］。１．２．１试剂配置硫酸溶液的浓度分别为０、０．５、１．０、１．５、
目前，检测乳制品中是否添加皮革水解蛋白的常规方法２．０、２．５、３．０ｍｏｌ／Ｌ。
有显色环法［６］、超声乳成分分析法［７］、石墨炉原子法［８］、比色１．２．２温度对显色反应的影响在３支试管中分别加入
法［９］、高效液相色谱法［１０］、离子交换色谱一积分脉冲安培４ｍＬ皮革奶和２ｍＬ３ｍｏｌ／Ｌ硫酸，分别放入８０、９０、１００℃温
法［１１］、高效液相色谱－质谱联法［１２］、高效液相色谱－蒸发光度的水浴中，记录不同水浴温度下开始显色的时间。
散射法［１３］和氨基酸自动分析仪法［１４］。常见的检测方法大都１．２．３硫酸浓度对显色反应的影响在７支试管中各加入
为定量分析，操作复杂、耗时长，不利于普通百姓用于快速简皮革奶４ｍＬ和２ｍＬ不同浓度硫酸溶液，另取１支试管加入
便定性检测。目前皮革奶定性分析方法仅有显色环法［６］，但２ｍＬ正常奶及２ｍＬ蒸馏水，混匀后再加入２ｍＬ３．０ｍｏｌ／Ｌ
该方法需要水浴浓缩，耗时较长。本研究试图建立乳及乳制的硫酸溶液，该试管作为空白管。将８支试管放置于１００℃
品中皮革水解蛋白简便快速的定性检测方法，利于普通百姓水浴，记录不同试管显粉红色的时间。
在日常生活中对乳及乳制品中是否添加皮革水解蛋白进行简１．２．４皮革奶显色检出限在７支试管中各加入２ｍＬ不同
便定性检测，为乳与乳制品监管提供技术支持。浓度（皮革奶中皮革水解蛋白粉含量分别为３０、２０、１０、５、１、
０５、０．