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超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析喹诺酮类抗生素残留量的检测方法
李建中，宋越

三重串联四极杆质谱是复杂基质中痕量组分定量分析的重要手段，通过多重反应监控模式（MRM）能够提供高选择性和高灵敏度的检测。建立在亚二微米粒径填料基础上的超高效快速液相色谱（RRLC）已得到广泛的应用，和QQQ联用能够提供高通量和高灵敏度的分离分析。本文运用UHPLC-QQQ对动物源性食品中的14种喹诺酮类抗生素进行定量分析，通过对重复性、线形关系等方法学参数进行考察，所建立的方法能在7.0分钟内对14种目标化合物完成快速、高灵敏度的检测分析。本方法采用Agilent6460QQQ系统，利用JetStream鞘流气技术大大提高了去溶剂效果，同时减少了喷雾造成的离子扩散损失，显著的提高了离子化效率，从而大大提高了灵敏度。本方法采用Agilent特有动态多反应监测（DynamicMRM）模式对多残留化合物进行监测，实现了自动最大化分配驻留时间(Dwelltime)的功能，兼顾了灵敏度及采样点数，实现了有机完美的统一，有效简化了方法的开发。本方法完全满足了国内外对喹诺酮类抗生素药物日益严格的残留限量监测要求。

1实验部分

1.1仪器与试剂
美国安捷伦公司6460QQQ质谱仪；美国安捷伦公司1260UHPLC。

1.2液相和质谱条件
液相色谱柱为安捷伦ZobaxEclipsePlusC18（2.1x50mm,1.8um）；流动相A为水（含0.1%体积比的甲酸+2mM乙酸铵），B为乙腈（含0.1%体积比的甲酸），梯度（B%/min）：8/0，10/1.0，15/4.0，50/5.0，80/5.5，8/5.8，8/7.0；柱温45oC；进样量5µL，流速为0.5mL/min。
QQQ质谱参数（ESI+模式）：干燥气温度（GasTemp）325oC，干燥气流量（GasFlow）5mL/min，雾化器压力（Nebulizer）50psi，鞘流气温度（SheathGasTemp）400oC，鞘流气流量（SheathGasFlow）12mL/min，毛细管电压（Capillary）3000V，MRM参数见表1，安捷伦MassHunter软件用于定性（Qualitative）和定量（Quantitative）分析。

2结果与讨论
图1为14种喹诺酮类抗生素的MRM叠加谱图。本文对MS和LC条件进行优化，对线形关系（R2）、检测限（LOQ）、峰面积重复性（RSD）等方法学进行了考察（见表2）。所建立的RRLC-QQQ能够对14种喹诺酮类抗生素进行高灵敏度和高通量的定量分析。

表1.14种喹诺酮类抗生素DMRM参数
Compound
NamePrecursor
IonProduct
IonFragmentorCollision
EnergyRetTime
(min)DeltaRetTimeDifloxacin400.2382.1138204.251Difloxacin400.2356.2138164.251Orbifloxacin396.2352.2128163.541Orbifloxacin396.2295.2128243.541Sarafloxacin386.1368.1128164.081Sarafloxacin386.1299.1128244.081Marbofloxacin363.2345.2123161.91Marbofloxacin363.2320.112381.91Ofloxacin362.2318.2133162.331Ofloxacin362.2261.2133282.331Enrofloxacin360.2342.2123203.361Enrofloxacin360.2316.3123163.361Danofloxacin358.2340.2138203.131Danofloxacin358.2255.1138403.131Lomefloxacin352.2308.2133122.941Lomefloxacin352.2265.1133202.941Pefloxacin334.2316.2133202.431Pefloxacin334.2290.2133162.431Ciprofloxacin332.1314.1138162.521Ciprofloxacin332.1231138362.521Enoxacin321.1303.2123202.061Enoxacin321.1232.1123362.061Norfloxacin320.1302.2128162.251Norfloxacin320.1276.2128122.251Oxolinicacid262.1244.294165.341Oxolinicacid262