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PAGE\*MERGEFORMAT-20- 江西省地方标准化指导性技术文件 粮食中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的检测量子点微球荧光免疫层析法 (征求意见稿) 编制说明 标准起草组 2022年10月 《粮食中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的检测 量子点微球荧光免疫层析法》编制说明 1.工作简况(包括任务来源、协作单位、主要工作过程、标准主要起草人及其所做的工作等) 1.1任务来源 根据《江西省市场监管局关于下达2022年第一批江西省地方标准化指导性技术文件制修订计划的通知》的要求,由南昌大学负责《粮食中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素的检测量子点微球荧光免疫层析法》的起草工作。起草单位成立标准起草组进行本标准制定的各项工作。项目计划编号:DB36/Z-2022-03。 1.2目的及意义 黄曲霉毒素B1(AFB1)是目前具有最强致癌性的真菌毒素,它对人和大多数的动物都具有强烈的毒性,对人及动物肝脏组织有较强的破坏作用,摄入微量即可造成肝脏严重损害并可导致肝癌甚至死亡。因黄曲霉和寄生曲霉等真菌广泛存在于自然界,其代谢产物AFB1也是环境中最常见的天然存在的污染毒素之一,主要污染粮油食品,如花生、玉米、大米、小麦、豆类和坚果类食品。 AFB1的污染广泛存在于土壤、粮食作物、食品和饲料中,尤其在玉米、花生和核桃中的污染最为严重。高秀芬等调查了6个省区197个花生样本中黄曲霉毒素的污染状况,115个样本呈阳性,平均浓度为91.74μg/kg,其中AFB1阳性率和平均浓度最高,分别为58.38%和77.77μg/kg。粮油食品中,大米、米制品、小麦粉和玉米粉中总黄曲霉毒素阳性率分别为35.3%、33.8%、13.9%和46.7%。据调查,我国6个地区的玉米平均黄曲霉毒素污染率为75.63%,总黄曲霉阳性样品的平均浓度为44.04μg/kg,其中AFB1污染最为严重,阳性率为74.55%。食用植物油中AFB1阳性率为2.49%,含量检出率为19.4%,其中花生油和玉米油中的AFB1含量相对较高,分别为3.67和2.36μg/kg,阳性率分别为4.7%和3.2%。殷国英等调查分析发现,AFB1在花生油和菜籽油中检出,而超标样品全部为花生油,花生油中AFB1的平均含量为16.2μg/kg,最高浓度为288μg/kg。 玉米赤霉烯酮(ZEN)具有雌激素的作用,其强度为雌激素的十分之一,可造成家禽和家畜的雌激素水平提高。目前发现猪对该毒素较为敏感。ZEN作用的靶器官主要是雌性动物的生殖系统,同时对雄性动物也有一定的影响。在急性中毒的条件下,对神经系统、心脏、肾脏、肝和肺都会有一定的毒害作用。 2000年,粮农组织相关机构的一项报告指出,全球有30-40%的谷物被ZEN污染。我国的谷物及其制品中ZEN污染也触目惊心,其中玉米的阳性检出率为45%,小麦的检出率为20%。水稻的检出率为25.4%。 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)也称呕吐毒素,其危害主要是引起动物的食欲下降,体重减轻、代谢紊乱等症状,大剂量可导致呕吐。动物对DON的反应有种属和性别差异,雄性动物对毒素比较敏感,猪比小鼠、家禽和反刍动物更敏感。DON在体内可能有一定的蓄积,但无特殊的靶器官,具有很强的细胞毒性。人畜摄入了被DON污染的食物后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳和反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统。另外DON对免疫系统有影响,有明显胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遗传毒性。 DON污染粮谷的情况非常普遍,世界各地均有报道。在我国胃癌、食管癌等恶性肿瘤高发区,其检出率和检出量都是最高的一种,检出含量最高者可达170.22mg/kg。在我国河北省食管癌、胃癌高发区居民饮食中污染率和含量均相当高。 我国对真菌毒素的防控非常重视,GB2761-2017《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》中对各种食品中的真菌毒素有明确限量规定,其中AFB1在玉米、花生及其制品不得超过20μg/kg;在稻米、糙米、大米及油脂及其制品中不得超过10μg/kg;在小麦、大麦及其他去壳谷物、坚果类及调味品中不得超过5μg/kg;婴幼儿及其配方食品和孕妇营养补充食品中限量最为严格,不得超过0.5μg/kg。ZEN在小麦及小麦粉、玉米及其制品中不得超过60μg/kg。DON在小麦及小麦粉、玉米及其制品中不得超过1000μg/kg。 真菌毒素因其分子量小,分布的基质复杂多样,目前主要的检测方法有两类:一类是利用毒素分子理化性质不同进行分离的方法,如:薄层层析法、高效液相色谱法和质谱联用法等;另一类是通过制备真菌毒素特异性抗体,利用抗原抗体反应来进行检测的免疫学方法,如:酶联免疫吸附法、免疫层析检测方法等。其中高效液相色谱法等仪器分析方法可以精确