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番茄枯萎病抗病基因Ⅰ-1的分子标记及种质资源筛选的综述报告 概述 番茄枯萎病是由革兰氏阴性菌Ralstoniasolanacearum引起的一种致命性病害,它可以侵害多种植物,尤其是影响最甚的是茄科作物,特别是番茄。其症状主要表现为根部失去生机,幼苗发生萎蔫,跟随着叶片枯黄、凋萎和死亡。番茄因此而引起的经济损失相当惊人,因此如何对该病进行有效的控制和减轻经济损失成为了研究的热点。 在许多研究中,抗病基因是遗传改良的重要策略之一。抗病基因是指能够使植物体抵抗或缓解病原菌侵害的基因。在番茄中,一些抗病基因已经被鉴定出来,例如Rgenes的家族和一些防御基因。 本文将介绍番茄抗病基因Ⅰ-1,讨论其在抗枯萎病方面的作用和应用,以及种质资源筛选中的分子标记技术。 番茄抗病基因Ⅰ-1 抗病基因Ⅰ-1是由Apiolaza等人在番茄中鉴定出来的,它的序列为Mi-1.2和Mi-1.2组成的基因家族。Mi-1.2和Mi-1.2基因在同一染色体,但它们的序列不同。这些基因被认为是RLK-like膜受体蛋白,它们通过识别侵染到细胞内的信号分子(例如蛋白质多糖),并参与激活下游的抗病反应。 实验证明抗病基因Ⅰ-1对多种类型的枯萎病病原体和其他病原菌都有保护作用,包括Ralstoniasolanacearum、褐斑病菌(Alternariasolani)和根结线虫(Meloidogynespp.)。抗病基因Ⅰ-1的作用机理比较复杂,但研究表明,它能够调节植物的免疫系统,从而使其产生多种方式的抗病反应,如细胞壁改变、产生毒素和活性氧的积累、defensin等抗病性蛋白的表达等。 分子标记技术在种质资源筛选中的应用 传统的种质资源筛选往往是通过大量地从自然种间杂交或人工杂交的后代中筛选出具有目标性状的杂交体,再通过重复自交、选择等手段,最终得到纯合的新品种。这种方法存在着基因底子窄,需耗费大量时间和人力物力的不足之处。 然而分子标记技术的发展使得种质资源筛选变得更加快捷和准确。通过分子标记技术,可以快速鉴别目标基因和非目标基因,从而提高筛选的效率和精确度。分子标记技术的应用包括PCR技术、限制性片段长度多态性技术和序列标记等多个方面。其中,PCR技术和序列标记应用相对较广。 PCR技术是通过合成导引引物,扩增特定序列的方法,选择PCR扩增产物大小快速进行筛选的一种方法。例如,Charrier等人,通过PCR扩增Mi-1.2基因的特定序列,成功地对番茄进行了抗病基因Ⅰ-1检测。其次,序列标记技术则是针对特定DNA序列,进行限制性酶切或测序,再通过PCR扩增,将特定的片段分离出来。例如,在基因组广泛测序的基础上,研究者可以针对Mi-1.2基因,设计和合成联锁图的分子标记,并进行PCR扩增和电泳分析。 结论 抗病基因Ⅰ-1是番茄中的一种重要抗病基因,对于抗枯萎病的控制起到了重要的作用。分子标记技术作为一种现代的筛选方法,已经在种质资源筛选中发挥了巨大的作用。通过PCR技术和序列标记等技术,不仅可以对抗病基因Ⅰ-1进行快速鉴定和筛选,而且可以为我们深入了解抗病基因Ⅰ-1的作用机理提供了便捷和精准的手段。