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猪胃肠炎病毒的分离鉴定及S基因的克隆、序列分析与原核表达的综述报告
猪胃肠炎病毒（Porcineepidemicdiarrheavirus，PEDV）是一种单链正链RNA病毒，属于科尔默科萨克病毒家族（Coronaviridaefamily）的科尔默病毒属（Coronavirusgenus），病毒颗粒为球形或卵圆形，直径约60-140nm，表面有刺状突起。该病毒主要引起猪的胃肠炎，导致腹泻、呕吐、食欲减退等症状，严重的可导致新生猪的死亡率高达80-100%。因此，PEDV对于猪场的经济和猪肉行业的稳定有着重要的影响。
猪胃肠炎病毒的分离鉴定是针对由PEDV引起的猪胃肠炎病毒感染的初步诊断步骤，通常可以采用细胞培养、RT-PCR和ELISA等技术进行检测诊断。细胞培养方法一般用Vero、ST或PK15等细胞进行检测，检测结果可通过显微镜观察病毒的形态和复制情况。RT-PCR是检测病毒RNA的灵敏和特异性方法，可通过引物的选择进行检测。ELISA则可通过检测血清中的抗PEDV抗体来诊断疾病，ELISA具有快速、简便、灵敏度高的优点。
除了PEDV的鉴定和诊断，PEDV的S基因克隆和序列分析也是研究PEDV分子生物学的重要内容之一。S基因编码的是病毒的表面刺状突起的蛋白质，也是PEDV的主要抗原位点，可诱导机体产生抗体反应。因此，分析S基因序列的变异和结构特征，对于了解PEDV毒株的分离和进化、免疫原性等方面的研究具有重要意义。当前，国内外已经报道了大量的PEDVS基因序列信息，也相应地发展出一系列的序列分析和比对方法，如Maximum-Likelihood(ML)、BootstrapAnalysis、Phylogenetictree等分析方法，已经被广泛地应用于PEDVS基因序列研究中。
此外，PEDVS基因的原核表达也是研究中的重要部分之一。采用原核表达PEDVS基因，可获得大量纯化的病毒蛋白，可以用于制备PEDV疫苗和抗体，为PEDV的防控提供有效手段。目前，原核表达方法主要包括大肠杆菌和酵母菌两种表达系统，可以通过重组DNA技术将S基因克隆到表达载体中，然后转化入宿主，产生大量的重组蛋白。此外，还可以通过吸附素结合ELISA、Westernblot等方法对表达的S蛋白进行检测和鉴定。
综上，分离鉴定和S基因的克隆、序列分析与原核表达是PEDV分子生物学研究的重要方向。未来，随着分子生物学技术的不断进步，PEDV病毒毒株进化和分布情况的详细了解，病毒致病机理的深入研究以及PEDV疫苗的研制和生产等方面的研究将变得更加精细、专业和深入。