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小鼠microRNA130ab的转录调控和功能研究的中期报告
一、研究背景及意义
miRNA是一类非编码的小RNA，在基因调控、胚胎发育、细胞周期和凋亡等生物学过程中扮演重要角色。miRNAs通过与靶基因mRNA的3’UTR相互作用来调控基因表达。miR-130已被证明在多种生物学过程中发挥关键作用，例如消化系统肿瘤发生、肿瘤细胞的侵袭和转移以及细胞凋亡等。然而，miR-130在小鼠中的转录调控和功能研究仍处于初步阶段。
二、研究进展
1.确定miR-130a和miR-130b的转录起始位点和调控因子
通过对小鼠基因组序列的研究和实验验证，我们发现miR-130a和miR-130b的转录起始位点分别位于小鼠基因组的chr8:144725317-144725358和chr1:124323745-124323786，近似为双子-冷凝体结构。在对转录因子的筛选中，我们检测到miR-130a的转录调控因子包括EGR1、Sp1和YY1，而miR-130b的转录调控因子包括GATA3和EGR1。
2.构建miR-130ab突变小鼠模型
我们使用CRISPR/Cas9技术构建了miR-130ab突变小鼠模型，该模型能够完全敲除miR-130a和miR-130b的表达。通过实验证实，敲除miR-130a和miR-130b可导致小鼠肝脏中的细胞增殖、凋亡和细胞周期发生异常。此外，miR-130ab突变小鼠模型表现出明显的心脏缩短和耐受力下降。
三、研究展望
miR-130在小鼠中的转录调控和功能研究仍处于初步阶段，还需要进一步探索其在其他生物学过程中的作用及其调控机制。未来的工作可以将注意力转向miR-130在肿瘤学中的应用，以及通过同源重组技术构建完整敲除和过表达模型以深入研究miR-130的生物学功能。