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毕氏酵母中重组人白介素15的表达纯化及其生物学活性鉴定研究的中期报告
本项目旨在利用毕氏酵母表达和纯化重组人白介素15（rIL-15），并对其生物学活性进行鉴定。
目前已完成以下工作：
1.构建rIL-15表达载体
根据rIL-15基因序列设计引物，进行PCR扩增，将其克隆至毕氏酵母表达载体pPIC9K中。经测序验证，亚克隆pPIC9K-rIL-15正确。
2.毕氏酵母转化及筛选
将pPIC9K-rIL-15转化至毕氏酵母GS115菌株中，经过多次筛选，得到稳定的rIL-15表达株系。
3.酵母培养和rIL-15表达
利用ShakeFlask进行批量培养，对rIL-15表达菌株进行感受体替换试验和筛选菌株。选用最优菌株进行表达，利用SDS-PAGE鉴定表达情况。
下一步工作计划：
1.利用His-tag亲和层析纯化rIL-15
使用His-TrapHP针对其His-tag，在絮凝物和回收液进行检测，最后通过酵母菌体裂解进行纯化。
2.利用WesternBlot鉴定表达纯化的rIL-15
使用WesternBlot方法进行鉴定，确定rIL-15纯度。
3.确定rIL-15的生物学活性
使用IL-15作为迹道，利用MTT细胞增殖检测法通过细胞系对rIL-15的生物学活性进行检测。
本项目还有一定的工作量需要完成，但已经取得一定进展，并有望在不久的将来获得一定的成果。