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μ-阿片受体内化及细胞内分选的调控机制研究的中期报告 中期报告:μ-阿片受体内化及细胞内分选的调控机制研究 一、研究进展 本研究旨在探究μ-阿片受体(μ-opioidreceptor,MOR)在细胞内的内化及分选机制。已完成以下实验: 1.确定了MOR在体外受到洛哌丁(Lop)的刺激后能够被明显激活,进而调控下游的细胞信号通路; 2.利用免疫荧光染色技术观察到MOR可以从细胞外膜上内化到内部,并发现该内化过程存在剂量依赖性; 3.借助荧光共聚焦显微镜观察到,MOR内化后进入细胞内部的囊泡结构(即内泡体),并在一定时间内逐渐迁移向细胞质内部; 4.在细胞富集体外基质的区域诱导MOR选择性内化实验中,发现MOR选择性内化至轴突末梢区,进一步说明了MOR内化及分选的复杂性和可调性。 二、下一步计划 目前,研究已经初步探明了MOR的内化及分选机制,但仍需进一步探究其调控机制。下一步计划为: 1.研究内化和分选的时间动态,探究剂量和时间对MOR内化和分选的影响; 2.利用蛋白质组技术筛查对MOR内化及分选有重要影响的蛋白质因子,包括神经元活性调节因子等; 3.尝试利用基因敲除技术探究具有内化分选功能的蛋白质或基因是否能调节MOR的内化和分选; 4.探究MOR嵌合蛋白与周围细胞的相互作用,进一步揭示MOR内化和分选的调控机制。 三、研究意义 本研究结果可为深入了解神经内递质信号传递过程提供理论基础。同时,MOR作为典型的临床药物靶点,本研究对于探究MOR的药理作用和寻找更可靠、更有效的药物靶点具有重要意义。